江苏省盐城中学高中生物 技术实践知识点总结 课题1 ＤＮＡ的粗提取与鉴定 苏教版选修1VIP专享

江苏省盐城中学高中生物 技术实践知识点总结 课题 1 ＤＮＡ的粗提取与鉴定 苏教版选修 1·提取 DNA 的溶解性原理包括哪些方面？DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度不同；DNA 不溶于酒精。·DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度有何特点？要使 DNA 溶解，需要使用什么浓度？要使 DNA 析出，又需要使用什么浓度？在 0.14mol/L 时溶解度最小；较高浓度可使 DNA 溶解；0.14mol/L 可使DNA 析出。·在溶解细胞中的 DNA 时，人们通常选用 2mol/LNaCl 溶液；将 DNA 分子析出的方法是向溶有 DNA 的NaCl 溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释 NaCl 溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但 DNA 却不能溶于酒精（特别是 95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下优点。一是抑制核酸水解酶活性，防止 DNA 降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加 DNA 分子柔韧性，减少断裂。·采用 DNA 不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？将 DNA 和蛋白质进一步分离。·提取 DNA 还可以利用 DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对 DNA 产生影响。温度值为 60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而 DNA 不会变性。补充：DNA 的变性是指 DNA 分子在高温下解螺旋，其温度在 80℃以上，如在 PCR 技术中 DNA 变性温度在 95℃。·洗涤剂在提取 DNA 中有何作用？洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。·当鉴定提取出的物质是否是 DNA 时，需要使用什么指示剂进行鉴定？在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺呈现蓝色。原理总结：通过利用不同浓度 NaCl 溶液溶解或析出 DNA，可以从细胞中提取和提纯 DNA；再利用酒精进一步将 DNA 与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是 DNA。实验材料的选取不同生物的组织中 DNA 含量不同。在选取材料时，应本着 DNA 含量高、材料易得、便于提取的原则。本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。一是因为鸡血细胞核的 DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。鸡血细胞破碎以后释放出的 DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少 DNA 的损失，最好使用塑料...