第2讲 动物细胞工程【重难点突破】一、动物细胞培养1、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个的细胞,然后,在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖
2、操作过程(1)细胞来源是幼龄动物的组织、器官,其细胞的分化程度低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养
(2)将组织分散成单个细胞:物理方法—剪碎;化学方法是用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理
(3)将分散的细胞和培养液组成细胞悬浮液,细胞生长时有接触抑制和贴壁生长现象
(4)培养条件:①无菌无毒环境:无菌——器具无菌处理,培养液加抗生素;无毒——定期更换培养液
②营养:使用合成培养基时要加入血清、血浆等天然成分(含有促生长因子)③温度和pH值:与被培养动物的体温相似,哺乳动物多数以36
5°C,多数pH为7
④气体环境:95%氧气和5%二氧化碳
二氧化碳主要调节培养液的pH
(5)原理:细胞增殖(6)胰蛋白酶的作用除把组织分散成单个细胞外,还有将贴壁细胞从瓶壁上分离下来
(7)培养结果:细胞株或者细胞系
细胞系的遗传物质发生改变
(8)应用:生产细胞产品如干扰素、疫苗和单克隆抗体;检测并判定某种物质的毒性的大小
【典题演示1】1、(2010浙江卷)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( )A
培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B
克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变C
二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D
恶性细胞系的细胞可进行付代培养【答案】D【解析】考查了细胞工程的有关知识,动物细胞培养可以分为原代培养,原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的为有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就是发生了癌变的细胞,遗传物质发