HE 染色试剂配置A:0、5~1%得伊红酒精溶液:称取伊红 Y0、5~1g,加少量蒸馏水溶解后,再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤,将滤渣在烘箱中烤干后,以 95%酒精(即工业酒精,假如不怕浪费,用无水乙醇配制也可)100毫升溶解。B:苏木素染液配方:(配制 3000ml,可按比列减少)苏木精 6g无水乙醇 100ml硫酸铝钾 150g蒸馏水 2000ml碘酸钠 1、2g冰醋酸 120ml甘油 900ml配制方法:将苏木素溶于无水乙醇,再将硫酸铝钾溶于蒸馏水,溶解后将甘油倾入一起混合,最后加入冰醋酸与碘酸钠。C:1%盐酸酒精分化液:将 1 毫升浓盐酸加入 99 毫升 70%酒精中即可。染色流程(1)二甲苯(Ⅰ)15min(2)二甲苯(Ⅱ)15min(3)二甲苯:无水乙醇=1:12min(4)100%乙醇(Ⅰ)5min(5)100%乙醇(Ⅱ)5min(6)80%乙醇 5min(7)蒸馏水 5min(8)苏木精液染色 5min(9)流水稍洗去苏木精液 1-3s(10)1%盐酸乙醇 1-3s(11)稍水洗 10-30s(12)蒸馏水过洗 1-2s(13)0、5%伊红液染色 1-3min(14)蒸馏水稍洗 1-2s(15)80%乙醇稍洗 1-2s(16)95%乙醇(Ⅰ)2-3s(17)95%乙醇(Ⅱ)3-5s(18)无水乙醇 5-10min(19)石炭酸二甲苯 5-10min(20)二甲苯(Ⅰ)2min(21)二甲苯(Ⅱ)2min(22)二甲苯(Ⅲ)2min(23)中性树胶封固注:①第(11)、(12)步可省去,(13)步冲水时间需延长至 20-30min。② 第(21)步假如不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。*冷冻切片 HE 染色步骤:(1)冰冻切片固定 10~30s(2)稍水洗 1~2s(3)苏木精液染色(60℃)30~60s(4)流水洗去苏木精液 5~10s(5)1%盐酸乙醇 1~3s(6)稍水洗 1~2s(7)促蓝液返蓝 5~10s(8)流水冲洗 15~30s(9)0、5%曙红液染色 30~60s(10)蒸馏水稍洗 1~2s(11)80%乙醇 1~2s(12)95%乙醇 1~2s(13)无水乙醇 1~2s(14)石炭酸二甲苯 2~3s(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s(17)中性树胶封固。注:第(14)步假如不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维与红细胞呈深浅不一得红色。4.12 切片脱水透明切片经 HE 染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。假如脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片 1-2 级无水乙醇脱水,也可使用石碳酸二甲苯进行脱水。石碳酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。5、H-E 染色评定标准:(1)切片完整,厚度 4...