电泳技术及其应用

电泳技术及其应用电泳技术 电泳技术，是指在电场作用下，带电颗粒由于所带的电荷不同以及分子大小差异而有不同的迁移行为从而彼此分离开来的一种实验技术。 一、电泳技术的基本原理 在电场中，推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。F,QE 质点的前移同样要受到阻力(F)的影响，对于一个球形质点，服从 Stoke 定律，即:F′,6πrην 式中 r 为质点半径，η 为介质粘度，ν 为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时:F,F′即 QE,6πrην 上式交换后可写成:V/E=Q/6&r@v ν/E 的含意为单位电场强度下的移动速度，里可用迁移率 μ 表示，即( ) 从上式可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。 二，电泳技术的分类:电泳法可分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类。 用支持体的电泳技术: 1.纸上电泳 2.醋酸纤维薄膜电泳 3.薄层电泳 4.非凝胶性支持体区带电泳 (支持体有:淀粉，纤维素粉，玻璃粉，硅胶等) 5.凝胶支持体区带电泳 ?淀粉液 ?聚丙烯酰胺凝胶 ?琼脂(糖)凝胶 不用支持体的电泳技术: 1.Tiselius 或微量电泳 2.显微电泳 3.等电点聚焦电泳技术 4.等速电泳技术 5.密度梯度电泳 三、影响电泳的因素 1、首先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状 一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反之则慢。泳动度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，泳动度与颗表面电荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比。带电荷的高分子在电解质溶液中把一些带有相反电荷的离子吸引在其周围，形成一离子扩散层。加以电场时，颗粒向符号相反的电极移动即带阳电荷颗粒移向负极，带阴电荷颗粒移向正移;离子扩散层由于带有过剩的与颗粒符号相反的电荷，可以向相反方向移动。结果颗粒与离子扩散之间的静电 引力使颗粒的泳动度减慢，另外，高分了颗粒表面有一层水，在电场影响下，它与颗 粒一起移动，可以认为是颗粒的一部分。 2、电场强度 电场强度也称电位梯度，是指单位长度(每一厘米)支持物体上的电位降，它对泳动度起着十分重要的作用。一般，电场强度越高，带电颗粒移动速度越快。根据电场强度大小，可将电泳分为常压电泳和高压电泳，常压电泳分离时间需数小时至数天，高压电泳时间短，有时仅几...