1.2 基因工程的基本操作程序学习目标： 1、简述基因工程原理及基本操作程序。2、尝试设计某一转基因生物的研制过程学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤。学习难点：1、从基因文库中猎取目的基因。 2、利用 PCR 技术扩增目的基因。课时安排：2 课时第一课时自主学习一一、基因工程的基本操作程序简述① 目的基因的 ； ② 的构建； ③将目的基因 ； ④ 目的基因的 。自主学习二二、目的基因的猎取：目的基因：符合人们需要的，主要指编码蛋白质的 。（一）从基因文库中猎取目的基因① 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导人受体菌的群体中 ，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因组文库：含有一种生物的 基因② 种类：cDNA 文库：含有一种生物的 基因注：cDNA：是反转录 DNA，是一种单链 DNA。③ 目的基因的猎取：根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物 mRNA、基因的 产物蛋白质等特性猎取目的基因。（二）利用 PCR 技术扩增目的基因PCR：是一项在生物体外 特定 DNA 片段的核酸合成技术。原理：DNA 分子复制的原理。条件：①引物（已知目的基因的 序列）、模板、四种脱氧核苷酸、热稳定的 DNA 聚合酶。过程： a．变性（ ℃）：目的基因 DNA 受热变性后接连为 ； b．退火（ ℃）：单链与 相应互补序列结合； c．延伸（ ℃）：在 的作用下延伸形成 DNA。 方式：指数扩增=2n（n 为扩增循环的次数）（三）用化学方法人工合成：基因较 ， 序列已知，可以人工合成。自主学习三三、基因表达载体的构建（核心）1、表达载体的组成：目的基因+ + +标记基因等。2、启动子：位于基因的 ，它是 结合的部位，驱动基因转录产生 mRNA。3、终止子：位于基因的 ，终止 。4、标记基因的作用是 受体细胞是否含有目的基因。5、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 给下一代；使目的基因 和发挥作用。 合作探究：基因表达载体的构建过程1、用一定的 切割质粒，使其出现一个切口，露出 。用 切割目的基因，使其产生________________。将切下的目的基因片段插入质粒的____ __处，再加入适量_____ ______，形成了一个重组 DNA分子（重组质粒）。2、将目的基因与运载体连接起来形成重组 DNA 分子需要哪些工具酶？3、将目的基因与载体混合并用 DNA 连接酶处理后，若 2 个 DNA 片段之间进行连接会出现几种结...
