2 基因工程的基本操作程序学习目标: 1、简述基因工程原理及基本操作程序
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程学习重点:基因工程基本操作程序的四个步骤
学习难点:1、从基因文库中猎取目的基因
2、利用 PCR 技术扩增目的基因
课时安排:2 课时第一课时自主学习一一、基因工程的基本操作程序简述① 目的基因的 ; ② 的构建; ③将目的基因 ; ④ 目的基因的
自主学习二二、目的基因的猎取:目的基因:符合人们需要的,主要指编码蛋白质的
(一)从基因文库中猎取目的基因① 基因文库:将含有某种生物不同基因的许多 ,导人受体菌的群体中 ,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库
基因组文库:含有一种生物的 基因② 种类:cDNA 文库:含有一种生物的 基因注:cDNA:是反转录 DNA,是一种单链 DNA
③ 目的基因的猎取:根据基因的有关信息:基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物 mRNA、基因的 产物蛋白质等特性猎取目的基因
(二)利用 PCR 技术扩增目的基因PCR:是一项在生物体外 特定 DNA 片段的核酸合成技术
原理:DNA 分子复制的原理
条件:①引物(已知目的基因的 序列)、模板、四种脱氧核苷酸、热稳定的 DNA 聚合酶
过程: a.变性( ℃):目的基因 DNA 受热变性后接连为 ; b.退火( ℃):单链与 相应互补序列结合; c.延伸( ℃):在 的作用下延伸形成 DNA
方式:指数扩增=2n(n 为扩增循环的次数)(三)用化学方法人工合成:基因较 , 序列已知,可以人工合成
自主学习三三、基因表达载体的构建(核心)1、表达载体的组成:目的基因+ + +标记基因等
2、启动子:位于基因的 ,它是 结合的部位,驱动基因转录产生 mRNA
3、终止子:位于基因的 ,终止
4、标记基因的作用是 受体细胞是否含有目的基因
5、表达载体的