第 34 讲 基因工程考点 1 基因工程的操作工具1．基因工程的概念2．限制性核酸内切酶(限制酶)3．DNA 连接酶4．载体1．(选修 3 P6“寻根问底”改编)DNA 连接酶和 DNA 聚合酶的作用相同吗？试简要说明。答案：不相同。DNA 连接酶连接的是两个 DNA 片段，而 DNA 聚合酶连接的是单个的脱氧核苷酸。2．(选修 3 P6“旁栏思考题”)想一想，具备什么条件才能充当“分子运输车”？答案：能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因及对受体细胞无害等。1．(2018·高考北京卷)用 XhoⅠ 和 SalⅠ 两种限制性核酸内切酶分别处理同一 DNA 片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是( )A．图 1 中两种酶识别的核苷酸序列不同B．图 2 中酶切产物可用于构建重组 DNAC．泳道①中是用 SalⅠ 处理得到的酶切产物D．图中被酶切的 DNA 片段是单链 DNA解析：选 D。不同的限制酶识别序列不同，A 项正确；限制酶切割的产物可用于构建重组 DNA，B 项正确；泳道①显示四个条带，是 Sal Ⅰ 处理后的酶切产物的电泳结果，泳道②显示三个条带，是 Xho Ⅰ 处理后的酶切产物的电泳结果，C 项正确；限制酶的作用特点是识别特定 DNA 序列，并在 DNA 两条链特定部位切割产生黏性末端或平末端，D 项错误。2．(高考全国卷Ⅲ)图(a)中的三个 DNA 片段上依次表示出了 EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ 和Sau3A Ⅰ 三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的 EcoR Ⅰ、Sau3A Ⅰ 的切点是唯一的)。根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经 BamH Ⅰ 酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接，理由是________________________________。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有____________，不能表达的原因是________________________________________________________________。(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的有_________和_________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________。解析：(1)由题图(a)可知，尽管 BamH Ⅰ 和 Sau3A Ⅰ 两种限制酶的识别位点不相同，但两种酶切割后产生的 DNA 片段具有相同的黏性末端，故被 BamH Ⅰ 酶切后得到的目的基因可以与题图(b)中表达载体被 ...
