《免疫学技术》综述2025 ． 6免疫细胞检测技术作者：学号： 免疫细胞是泛指所有参加免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前身，包括造血干细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞及其他抗原提呈细胞、粒细胞、红细胞、肥大细胞等。各种免疫细胞的分离、纯化及其功能测定对于了解其在免疫应答中的作用及相互关系有着重要意义。免疫细胞的检测即是用体外试验对机体各种参加免疫应答或与免疫应答有关的细胞进行分离、纯化鉴定、计数和功能测定，藉以了解机体的免疫状态，并对某些临床疾病的诊断、疗效观察及预后推断等也有一定意义。本综述将就免疫细胞的分离、免疫细胞功能的检测和细胞凋亡的检测三个方面主要方法的基本原理作简要介绍。一．免疫细胞的分离 免疫细胞包括多种细胞成分，例如淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、红细胞等。它们具有不同的形态和功能特性，这不仅是我们认识各种免疫细胞的依据，也是分离各种免疫细胞的基础。细胞的形态特征反映在其物理性质上，如各种细胞的大小、比重、表面电荷和粘附能力等存在差异;而细胞的功能特征往往由该细胞膜表面的蛋白质(表面标记)来体现，例如各种免疫细胞执行特定功能必须表达的受体等。根据不同形态和功能特征，可以将各种免疫细胞从混合细胞群体中分离出来。免疫细胞分离原理基本上可以归纳为基于细胞物理性状的分离方法和基于细胞表面标记的分离方法。基于细胞物理性状的分离方法 (一)根据各种细胞比重的差异 1.自然沉降法 2.密度梯度离心法人外周血单个核细胞(PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形状和比重与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞比重较大，为 1.00 左右，而淋巴细胞和单个核细胞比重为 1.075 左右。利用密度在 l.077 万±0.001 之间近于等渗的Ficoll-Hypque 混合溶液(称为淋巴细胞分层液)作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集。血浆和血小板由于密度较低，故悬浮于分层被的上部;红细胞与粒细胞由于密度较大，故沉于分层液的底部;PBMC 密度稍低于分层液，故位于分层被界面上，这样就可获得 PBMC o（如图 1-1 所示）图 1-1 淋巴细胞分离示意图3.改变细胞密度法巨噬细胞能够吞噬铁粉，增加其比重，通过密度梯度离心或磁场将其分离;T 细胞能够与绵羊红细胞形成花环，形成的花环复合物比重大，借助密度梯度离心将 T 细胞分离。 （二）根据细胞吸附特性 巨噬细胞能够非特异性粘附于玻璃或塑料表面，根据这种特性可以将巨噬细胞从混合细胞群体...
