1.载体得定义？ 载体:指携带外源基因进入受体细胞得运载工具,它得本质就是 DNA 复制子。2.载体必须具备得 3 个基本条件?载体得碱基对越多越好？（1） 基本条件:1 具有复制子,能在宿主细胞内自主复制,并携带重组 DNA 分子一同扩增;（2） 2 具有单一限制性内切酶得酶切位点或多克隆位点;（3）3 有合适得选择标记基因,用来筛选重 组 DNA。3.载体得碱基对越少越好,否则容易错配、4.目前讨论最深,使用最多得载体有？ 目前讨论最深、使用最多得载体就是经过改造得质粒载体与噬菌体载体。5.按功能分,有哪些载体？克隆载体得概念？表达载体得概念？ (1)按功能分,可分为克隆载体、表达载体、测序载体、转化载体、穿梭载体、多功能载体等。(2)克隆载体:携带插入外源片段得质粒或噬菌体,从而产生更多物质或蛋白质得产物。(3)表达载体:在克隆载体基本骨架得基础上增加表达元件(如启动子、PBS、终止子),使目得基因能够表达得载体。6.选择标记有哪些？插入失活、a 互补就是什么意思？ (1)选择标记有插入失活与 a 互补(2)插入失活:若把外源 DNA 片段插入到载体得选择标记基因中而使基因失活,丧失其原有得表性特征。(3)a 互补:单独存在得 a 及 w 片段均无 β 半乳糖苷酶活性,只有宿主细胞与克隆载体同时共表达两片段时,宿主细胞内才有 β 半乳糖苷酶活性,使特异性作用物变为蓝色化合物。7.列举常用得质粒载体名称？ PBR322 质粒、PUC 载体、TA 克隆载体8.噬菌体得溶原状态就是指？ 噬菌体感染大肠杆菌时,可能进入一个溶菌循环,结果导致细胞得裂解,释放出噬菌体颗 粒;或者进入与宿主不同程度得稳定状态。9.噬菌体 DNA 由哪三个部分组成？目得基因插入哪个部分？ (1)噬菌体 DNA 由左臂、中臂、右臂三部分组成。(2)目得基因插入中臂(非必须区)部分。10.超级载体得特点？有哪些超级载体？ 1)超级载体得特点:运载量大(2)超级载体:YACs、BACs11.表达载体与克隆载体有什么最大得区别？ 表达载体有强大得启动子与 SD 序列,而克隆载体没有12.限制性内切酶 限制性内切酶:能识别 DNA 分子上得特定位点并将双链 DNA 切断得酶13.DNA 连接酶,T4 连接酶 DNA 连接酶:一种能够在两条 DNA 链之间催化 5’P 与 3’OH 形成磷酸二酯键得酶 T 4 连接酶:连接黏性末端或平末端得酶14.DNA 聚合酶,Taq 聚合酶 DNA 聚合酶:催化脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs)聚合成 DNA 得酶 Taq 聚合酶:从嗜热水生菌中分离纯化出来得 15...
