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0809植物组织培养实验教案

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实习二 营养培育基配制一、培育基母液配制为了减少工作量,减少多次称量所造成的误差,一般将常用药品配成比所需浓度高 10—100 倍的母液,现以 MS 培育基为例,预先配制,四组不同母液,说明母液的配制方法。MS 培育基母液配制(单位:毫克 mg)注意:1.大量元素根据使用时高 10 倍的数值称取,分别将各种化合物称量后,除CaCl2·2H2O 单独配制外,其余化合物混合在 500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解,用玻璃棒搅拌促溶,倒入 1000ml 容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,置小口瓶中保存,贴上标签注明化合物名称(或编号),浓缩倍数,配制日期和配制者姓名,CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。2.微量元素母液按要求浓缩 100 倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐(FeSO4·7H2O 和 Na2-EDTA.2H2O)作为一组单独配制外,其余化合物分别置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,混合定容在 1000ml 容量瓶中,置小口瓶中保存,贴上标签。3.铁盐配制将 FeSO4·7H2O 和 Na2-EDTA.2H2O 分别溶于 450ml 蒸馏水中加热,不断搅拌,溶解后两液混合,调 PH 5.5 加水定容至 1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。4.有机物母液配制,按母液要求浓缩 50 倍,除蔗糖按 3%单独临时称量外,其余分别称量后,溶解,定容在 500ml 容量瓶中,置于小口瓶中保存,贴上标签。5.母液最好在 2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜过长,无机盐母液最好在一个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就不能再使用。6.制备母液和营养培育基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求,化学药品必须是高纯度的(分析纯)。7.称量药物采纳高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。二、养培育基配制程序母液成 分规定量浓缩倍数称取量母液体积配 制 1 升 培育 基 吸 取 量定容编号种类I大量元素KNO3190010190001000100NH4NO316501016500MgSO4·7H2O370103700KH2PO4170101700CaCl2·2H2O440104400II微量元素MnSO4·4H2O22.3100223010010ZnSO4·7H2O8.6100860H3BO36.2100620KI0.8310083Na2MoO4·7H2O0.2510025CuSO4.5H2O40.0251002.5CoCL2.6H2O0.0251002.5铁盐Na2-EDTA37.31003730100010FeSO4.4H2O27.81002780III有机物甘氨酸2.05010050010盐酸吡哆醇0.55025盐酸硫铵素0.1505烟酸0.55025肌酸100505000(一)母液吸取量的计算 配制培育基的升数公式 1:母液吸取量= 母液体积×——————————母液浓缩倍数 培育基要求的含量 公...

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