第一部分 果蝇培育基的配制培育基的配制:培育果蝇前需要配制培育基,培育基成分如下表(表 1)所示:果蝇培育基 2000ml表 1 果蝇培育基配方表成分含量成分含量果蝇培育基① 玉米粉180g② 大豆粉20g③ 琼脂15g④ 啤酒酵母37g⑤ 糖稀80g⑥ 麦芽糊精80g⑦ 对羟基苯甲酸甲酯溶液(防腐剂)16ml(2
5g 对羟基甲酸甲酯固体粉末溶于 16ml 95%的乙醇中)操作:1)先 1
5L 水烧开,然后①玉米粉溶于额外 500ml 水中,慢加并混匀,再慢慢加入已煮沸的 1
5L 水中,混匀,煮沸后,调节温度至 50 度,保温 3-4 小时(约 50 度左右)2)大约保温 3 小时左右,回到实验室,进行接下来的预备工作
将②、③、④、⑥混合搅匀,一块加入保温的玉米糊中,边加边搅拌至混合均匀
3)紧接着,加入⑤,慢加快搅,此步很重要,务必防止糖稀粘锅煮糊
4)然后,将温度调大一块煮沸,再将温度降下来,冷却至60度左右(可用冷水浴约3min的方法较快速降温),待温度冷却下来,即加入⑦防腐剂,用玻璃棒搅拌均匀后分装到培育瓶内,注意在分装时不要把培育基倒在瓶壁上
用瓶塞塞好,使多余的水分蒸发出去,待培育基冷却后塞好瓶塞,放入冰箱
分装至每瓶高 1cm 左右
注:2L 培育基可倒瓶约 100-120 个左右
若配置 1L 培育基,以上成分均减半
注意在分装时不要把培育基倒在瓶壁上
刚配制完的培育基放凉后在瓶壁上会有许多水滴,这时假如把果蝇放进去,水滴可能将果蝇的翅膀粘住,为避开发生此事,可将配好的培育基放在温箱内 2~3d,待水分蒸发后再使用,或用酒精棉将瓶壁上的水分擦掉
分装培育基时,注意不要将培育基倒在侧壁上,这样果蝇会将大量的卵产在壁上,产在壁上的卵是无法孵化的
在配制培育基的过程中,既要尽量避开培育基被煮糊,又要注意在装瓶的过程中尽量不出现培育基贴壁现象,只有整个过程