正常状态的输液泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于 2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢平稳的。在日常使用过程中出现压力不稳的现象。主要原因有几点: 管路里有气泡。 输入单向阀失效所致,这也是常常遇见的。 密封圈磨损导致泄漏所造成。 1、排除管路里气泡的方法是: 打开排空阀,用针筒多抽几下,排出气泡。再用流动相冲洗一段时间。为了加快排出气泡,还可以关紧排空阀,堵住检测器上的背压管,使流通池的压力增加,赶出气泡(但需注意不能压力太高,以免损坏流通池)。 2、 排除单向阀失效的方法为: 造成单向阀失效原因:泵内残留流动相与宝石球粘连。如长期不使用容易造成类似情况,所以在长期不使用的情况下,应每二周用甲醇作为流动相,开机冲洗 1 小时,使管路充满。 流动相内杂质或其它原因污染了单向阀。虽然流动相是 HPLC 级的,又经过过滤,但长期使用后仍难免会产生污染。 推断单向阀失效的方法:将泵接上蒸馏水作为流动相。(请勿打开 UV 检测器与工作站)。打开排空阀,用 30 ml 的针筒抽出些流动相,确认泵中已有该流动相,然后将针筒内的液体排出,并重新接在排空阀上。 将泵设置流量为 5ml/min,冲洗 5min(注意:此时排空阀仍要打开,否则将冲坏色谱柱)。冲洗完毕后,查看针筒内流动相体积是否为25ml(5×5=25),若正确,则说明该泵在低压情况下无故障;若不正确,则说明该泵中某一单向阀失效(一般多为输入单向阀)。 如是双泵梯度分析系统,泵压力不稳一般是其中一台压力不稳所致,可逐个分析。 3、 单向阀失效处理方法: 拧下输入单向阀(一共两个)。 将 2 个单向阀放入有蒸馏水的超声波清洗器,清洗 10 分钟。 用冲洗工具冲洗二、三次。冲的时候注意要用手按住单向阀前头,防止把阀内零件冲失。 完毕后,将输入单向阀装回原位即可(单向阀是高压部件,须拧紧,防止泄漏)。 若梯度系统两个泵在低压状态下流量都正确,则建议分别将两泵连接上色谱柱进行高压测试。 4、高压测试具体操作方法: 在双泵分析系统连接的前提下(注:不必打开 UV 检测器),先打开其中一泵(请确认已接好流动相)。 设置流量为 1ml/min。 启动泵。 观察运行期间泵的压力是否稳定。若稳定,说明泵无问题;若泵压力不稳,则应检查各管路接头有无泄露,并将有泄漏的接头拧紧;若无泄漏,则问题可能还是出在单向阀上,须再次冲洗单向阀,可反复几次。 重复...