实验七 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备和观察生 64 王攀 2025030026同组实验人：池月 实验日期：2025 年 11 月 3 日一、实验目的1、解利用动物骨髓进行细胞染色体制片的一般方法，比较与其他制片方法的区别。2、正确掌握细胞收集、低渗、滴片等技术手段，观察和了解小鼠染色体的数目及形态特征。二、实验原理染色体的数目及形态特征在一个物种内是相对稳定的，染色体上的基因决定了一个物种生长发育的全部信息。因此通过染色体分析，可以了解某一物种最基本的遗传指标。进行染色体标本的制备一般取自细胞分裂旺盛的组织，如骨髓、淋巴细胞以及通过人工培育的悬浮液。动物的骨髓是重要的造血器官，它通过细胞分裂不断补充体内的需要，如将秋水仙素注射到动物的腹腔内，经肠系膜吸收并可转运到骨髓，结果使正在分裂的细胞不能形成纺锤体，使得染色体停在中期状态，经过处理和制片后就可以清楚地观察到染色体。这种制片方法虽然也经过许多步骤，但是效果非常好。而且省去了细胞培育的阶段，可以获得大量分裂细胞，但是属于侵害性的，因此这种方法适用于动物来源丰富、动物个体较小的材料。三、实验仪器、材料和用具实验材料体重 20 克左右的小鼠一只仪器用具恒温水浴槽、离心管 2 支、刀片、解剖盘、解剖剪、镊子、离心机、光学显微镜、带数码相机的光学显微镜药品试剂0.075mKCl 低渗液、固定液（甲醇：醋酸＝3:1）、0.4%秋水仙素、改良苯酚品红溶液四、实验步骤ProceduresAttention腹腔注射秋水仙素溶液：在做实验前 2~3 小时，对实验用小鼠按 0.1ml/20g 小鼠的量对其进行 0.4％的秋水仙素注射。（此步由老师完成）取材：实验时，用断颈法迅速将小鼠处死，通过解剖取出股骨，用刀片将附着在股骨上的肉剥离洁净，剪开股骨头，暴露骨髓腔。用注射器吸取低渗液 1~2 毫升，将针头插入骨髓腔中冲洗骨髓，使冲洗液从股骨的另一端流出。收集冲洗液到 5ml 刻度的离心管中。低渗液需要在 37℃下保温。低渗：用吸管将冲洗液吹打几次，然后把离心管放在 37℃恒温水浴槽内低渗 20 分钟。时间稍长比较合适。固定：之后取出并加 1ml 的固定液，吹打之后放入 37℃恒温水浴槽内固定 10 分钟。离心：然后将 1000rpm 离心 10 分钟，弃去上清。再固定：加入固定液继续固定 10 分钟。先吹打，再放入恒温水浴槽离心：再 1000rpm 的速度离心 10 分钟。弃去上清。制备细胞悬液：离心结束后，弃去上清。小心操作，避开将沉淀悬起，...
