实验报告课程名称： 饲料学 指导老师： 成绩： 实验名称：饲料中维生素 E 的测定高效液相色谱法 实验类型： 一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、主要仪器设备（必填）四、操作方法和实验步骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析（必填）七、讨论、心得一、 实验目的和要求1、学习了解维生素 E 的测定方法；2、学会使用高效液相色谱仪；3、学习了解皂化提起法的原理与方法；4、学习高效液相色谱仪的工作机理。装 订 线二、 实验内容和原理用碱溶液皂化试验样品，使试样中天然生育酚释放出来，添加的生育酚乙酸酯转化为游离的生育酚，乙醚提取，蒸发乙醚，用正己烷溶解残渣。试液注入高效液相色谱柱，用紫外检测器在280nm 处测定，外标法计算维生素 E 含量。三、 主要仪器设备高效液相色谱仪；恒温水浴锅；旋转蒸发器；圆底烧瓶。四、 操作方法和实验步骤试剂配置：1）L 抗坏血酸乙醇溶液：称取 1.25g L-抗坏血酸结晶纯品溶解于 12mL 温热的蒸馏水中，用无水乙醇稀释至 250mL，临用前配制；2）氢氧化钾溶液：500g/L；3）维生素 E(生育酚)工作液：80ug/mL皂化3.0g（m1）仔猪预混料→圆底烧瓶→50mL 抗坏血算乙醇溶液→分散、浸湿→水浴（90℃）至沸点→稍冷却后加 10mL KOH→回流 30min（不时震荡摇匀）→皂化结束冷凝管顶端加入 5mL 乙醇、5mL 蒸馏水→取出烧瓶冷却至约 40℃。提取转移皂化液于 100mL 无水乙醇的 500mL 分液漏斗中→用 50mL蒸馏水分 2 次冲洗→转移至分液漏斗中→加盖放气混匀→剧烈震荡 2min→静止分层→用锥形瓶接收水相和乙醚相→转移水相于分液漏斗→分次用 100mL、60mL 乙醚重复提取两次→合并乙醚相→用蒸馏水 100mL 洗涤乙醚至中性→加入无水硫酸钠（变澄清）→转移上清液至 250mL 棕色容量瓶中→定容浓缩取 6mL 上述乙醚提取液→50℃水浴，氮气吹干→加入 2mL 甲醇→有机滤膜过滤→HPLC 分析五、 实验数据记录和处理表 1、维生素 E 测定（本人数据为 1#组）组别样品质量（g）峰面积值浓度（ug/mL）维生素E 含量（IU）维生素 E含量（mg/kg）均值（mg/kg）标准AA 182270均值：1814380 16标准AA21806021#3.0006 7515633.138 920.316 1012.449 1141.409 2#3.0008 9949243.869 1218.258 1340.218 3#3.0000 7204831.768 882.444 970.786 4#3.0008 9221440.660 1129.143 1242.182 我组的相对偏差为（1141.409-1012.44...
