SHMT 基因工程菌的构建第四组一、实验相关知识1、丝氨酸羟甲基转移酶是丝氨酸合成中的关键酶,能催化甘氨酸和丝氨酸的相互转化，具体的催化反应如下： SHMT 甘氨酸+N5，N10-亚甲基四氢叶酸 L—丝氨酸+四氢叶酸在丝氨酸羟甲基转移酶（SHMT）作用下，甘氨酸同亚甲基四氢叶酸反应生成 L-丝氨酸。该反应需要 5-磷酸吡哆醛作为辅酶.N5,N10—亚甲基四氢叶酸上亚甲基可以来自于甘氨酸、甲醛、甲酸、蛋氨酸、胆碱和肌氨酸，它们同四氢叶酸反应生成 N5,N10—亚甲基四氢叶酸。本实验以甘氨酸和甲醇为前体物发酵生产 L—丝氨酸时，菌体积累 L-丝氨酸与菌体含有的 SHMT 的活性直接相关,但由于 SHMT 的催化作用理论上是双向的,有必要了解在相同的培育条件或者在本文所用的菌株SHMT 是否具有双向催化作用.2、基因工程(genetic engineering）又称基因拼接技术和 DNA 重组技术，是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种 DNA 分子，然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的讨论提供了有力的手段。基因工程是生物工程的一个重要分支，它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA 大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的 DNA 分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户"，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。3、丝氨酸是一种非必需氨基酸，它在脂肪和脂肪酸的新陈代谢及肌肉的生长中发挥着作用，因为它有助于免疫血球素和抗体的产生，维持健康的免疫系统也需要丝氨酸.丝氨酸在细胞膜的制造加工、肌肉组织和包围神经细胞的鞘的合成中都发挥着作用。［大肠杆菌］ 细菌染色体 DNA 的制备（预习方案）一．实训目的。学习并掌握细菌基因组的基本知识和提取方法二．实训原理及相关知识1. 大肠杆菌（Escherichia coli，E。coli）革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3 微米。周身鞭毛，能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺乳进入肠道，与人终身相伴,几占粪便干重的 1/3...
