Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

Tris 是什么？有什么作用?Tris-HCl，Tris-EDTA 如何配制？Tris：三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl）aminomethane,一般简称为 Tris)是一种有机化合物，其分子式为（HOCH2）3CNH2。Tris 被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如，在生物化学实验中常用的 TAE 和 TBE 缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到 Tris。由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应 Tris 为弱碱，在室温（25℃下，它的 pKa 为 8.1;根据缓冲理论，Tris 缓冲液的有效缓冲范围在 pH7.0 到 9。2 之间.Tris 碱的水溶液 pH 在 10.5 左右,一般加入盐酸以调节 pH 值至所需值,即可获得该 pH 值的缓冲液。但同时应注意温度对于 Tris 的 pKa 的影响。 由于 Tris 缓冲液为弱碱性溶液,DNA 在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。人们常常在 Tris 盐酸缓冲液中加入 EDTA 制成“TE 缓冲液”,TE 缓冲液被用于 DNA 的稳定和储存。假如将调节 pH 值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE 缓冲液"（Tris/Acetate/EDTA)，而换成硼酸则获得“TBE 缓冲液”(Tris/Borate/EDTA）。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。用途：有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的 PH值。在凝胶中也起到稳定 PH 的作用，只不过是 Tris-HCl 缓冲体系。 Tris 缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。Tris 被用于不同pH 条件下的蛋白质晶体生长。Tris 缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C. elegans 核纤层蛋白 lamin)的中间纤维的形成。Tris 也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一.此外，Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物.Tris 也被用作滴定标准物。1 M Tris—HCl （pH7.4,7。6，8.0）组份浓度 1 M Tris—HCl配制量 1L配制方法:1。称量 121。1 g Tris 置于 l L 烧杯中。2.加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3。按下表加入浓 HCl 量调节所需要的 pH 值。pH 值 浓 HCl7。4 约 70 ml7。6 约 60 ml8.0 约 42ml4。将溶液定容至 1 L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高 1℃，溶液的 pH 值大约降低 0。03 个单位。1.5 M Tris—HCl （pH8.8) 组份浓度 1。5 MTris-HCl配制量 1 L配制...