基因工程的基本操作程序阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测和鉴定等步骤。知识点一 目的基因的获取.目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。.目的基因的获取方法(1)从基因文库中获取① 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。② 种类③ 提取依据：基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物 mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性。(2)利用 PCR 技术扩增目的基因①PCR 的含义：是一项在生物体外复制特定 DNA 片段 的核酸合成技术。② 目的：短时间内大量扩增目的基因。③ 原理：DNA 双链复制 。④ 过程第一步：加热至 90～95 ℃，DNA 解链 ；第二步：冷却至 55～60 ℃，引物结合到互补 DNA 链；第三步：加热至 70～75 ℃，热稳定 DNA 聚合酶 (Taq 酶)从引物起始进行互补链的合成。如此重复循环多次。⑤ 特点：指数形式扩增。(3)人工合成如果目的基因较小，核苷酸序列又已知，可通过 DNA 合成仪用化学方法人工合成。1．cDNA 文库与基因组文库的区别文库类型cDNA 文库基因组文库文库大小小大基因中启动子无有基因中内含子无有基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种间的基因交流可以部分基因可以2.PCR 技术与 DNA 复制的区别项目DNA 复制 PCR 技术解旋方式解旋酶催化DNA 在高温作用下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在扩增仪内)酶解旋酶、普通的 DNA 聚合酶等耐热的 DNA 聚合酶(Taq 酶)温度条件细胞内温和条件需控制温度，在较高温度下进行 合成的对象DNA 分子DNA 片段或基因3.获取目的基因的方法项目基因组文库部分基因文库(如cDNA 文库)PCR 技术扩增人工合成过程优点操作简单专一性强可在短时间内大量扩增目的基因专一性强，可产生自然界中不存在的新基因缺点工作量大、盲目性大、专一性差操作过程较麻烦，技术要求过需要严格控制温适用范围小高度、技术要求高1．下列有关获取目的基因的方法的叙述，错误的是( )A．直接分离目的基因的方法的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性B．由于真核细胞的基因含有不表达的 DNA 片段，一般使用人工合成的方法C．目前人工合成基因的方法主要有两种，分别是...
