第 5 课时 微生物的实验室培养(二)[学习导航] 1.通过阅读教材 P16～17“(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基”，掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。2.结合教材 P18～19“(二)纯化大肠杆菌”，理解并掌握利用平板划线法和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。[重难点击] 1.掌握制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法。2.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基，大肠杆菌的纯化就是用的该培养基。1.牛肉膏蛋白胨培养基的成分及各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏 5.0 g碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨 10.0 g碳源、氮源和维生素NaCl 5.0 g无机盐蒸馏水定容至 1 000 mL氢元素、氧元素2.制备步骤(1)培养基的配制计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制 100 mL 培养基时各成分的用量↓称量↓溶化↓调节 pH ：1 moL 的 NaOH、pH 试纸，将 pH 调为 7.4 ～7.6↓分装：趁热分装到洁净锥形瓶中↓加棉塞：用棉花不用脱脂棉，脱脂棉吸水↓包扎：外包牛皮纸，且挂标签(2)灭菌(3)倒平板① 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。② 右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。③ 用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。④ 等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。1.填表比较溶化时两次使用玻棒搅拌的目的操作搅拌的目的往烧杯中加入蛋白胨和氯化钠后用玻棒搅拌促使蛋白胨和氯化钠溶解加入琼脂，加热使其熔化的过程中使用玻棒搅拌防止琼脂糊底而导致烧杯破裂2.倒平板时的注意事项(1)培养基灭菌后，需要冷却至 50 ℃左右时，才能倒平板的原因是什么？你用什么办法来估计培养基的温度？答案 琼脂是一种多糖，在 98 ℃以上熔化，在 44 ℃以下凝固，倒平板时高于 50 ℃则会烫手，低于 50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。(2)分析下图，回答①、②问题：① 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答案 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。② 从防止杂菌污染的角度思考，平板冷凝后将平板倒置的原因是什么？答案 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置...
