2.2.1 动物细胞培养和核移植技术1.简述动物的细胞培养及条件。(重点)2.举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。3.简述动物核移植的过程及意义。(重、难点) 动 物 细 胞 培 养(一)动物细胞工程1.常用的技术手段:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。2.基础:动物细胞培养技术。(二)动物细胞培养1.概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。2.过程取动物组织块 分散组织细胞:剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间 制成细胞悬液 原代培养:具有贴壁生长和接触抑制的特点 传代培养3.相关概念(1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。(2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象。(3)原代培养:指动物组织消化后的初次培养。(4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现接触抑制后,需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖的培养过程。4.培养条件(2)营养(3)温度和 pH(4)气体环境5.应用连线表示动物细胞培养的应用及实例① 生产生物制品 a.筛选抗癌药物② 用于基因工程b.干扰素、单克隆抗体③ 检测有毒物质 c.培养受体细胞d.判断物质毒性提示:①—b ②—c ③—d ④—a探讨:为什么切取动物组织块进行细胞培养时,常选择胚胎或幼龄动物的器官或组织?提示:因为这些细胞增殖能力强,分化程度低,更容易培养。探讨:在进行动物细胞培养过程中,为什么需用胰蛋白酶处理动物组织?提示:因组织中细胞间基质成分为蛋白质,利用胰蛋白酶可以分解细胞间的蛋白质。探讨:探究动物细胞培养时,为什么要在培养基中加入血清、血浆等天然成分?提示:因血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质,如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。因此细胞培养时,为保证细胞能顺利生长和繁殖,一般需添加血清血浆等天然成分。探讨:动物细胞培养需要控制的气体环境是怎么样的?各自起什么作用?提示:95%的空气和 5%的 CO2混合气体;O2维持细胞代谢,CO2维持培养液的 pH。1.动物细胞培养的操作流程2.过程解读(1)动物细胞培养需要满足的条件① 充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。② 适宜的温度:哺乳动物多以 36.5±0.5 ℃为宜。③ 适宜的 pH:多数细胞生存的适宜 pH 为 7.2~7.4。④ 气体环境(2)原理:细胞增...