第二节 基因工程的基本操作程序学 习 目 标课 程 标 准1．了解目的基因获取的常见方法。2．理解基因表达载体的构建是基因工程的核心。(重、难点)3．掌握将目的基因导入受体细胞的方法。(重点)4．理解目的基因的检测与鉴定。1．简述基因工程的原理及技术。2．观看基因工程的影像资料。基础知识·双基夯实基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：①__目的基因的获取__、②__基因表达载体的构建__、③__将目的基因导入受体细胞__、④__目的基因的检测与鉴定__。一、目的基因的获取1．从基因文库中获取目的基因：将含有某种生物⑤__不同基因__的许多 DNA 片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的⑥__不同基因__，称为基因文库。基因文库可大可小，如果它包含了一种生物所有的基因，就叫⑦__基因组文库__；如果它只包含一种生物的一部分基因，就叫⑧__部分基因文库__，如⑨__cDNA 文库 __。2．从基因文库中获取目的基因的具体方法：可根据基因的⑩__核苷酸__序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物 mRNA 以及基因的表达产物⑪__蛋白质__等特性来获取目的基因。3．利用 PCR 技术扩增目的基因：PCR 技术是一项在生物体外⑫__复制__特定 DNA 片段的核酸合成技术。(1)原理：利用⑬__DNA 双链复制 __原理，将基因的核苷酸序列不断加以复制，使其呈指数方式增加。指数扩增约为 2n(n 为扩增循环的次数)。(2)条件：已知目的基因的一段⑭__核苷酸__序列以便合成⑮__引物__、⑯__模板DNA__、⑰__热稳定 DNA 聚合酶 ( 或 Taq 酶 ) __。(3)过程：目的基因 DNA 受热变性后解链为⑱__单链__，与引物结合，然后在⑲__热稳定DNA 聚合酶 ( 或 Taq 酶 ) __的作用下进行延伸形成 DNA。4．人工合成法：⑳__基因__比较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。二、基因表达载体的构建(基因工程的核心)1．目的：__是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用__。2．组成：目的基因(符合人们需要的，编码蛋白质的__结构基因__)、__启动子__(是一段有特殊结构的__DNA 片段 __，位于基因的首端，是__RNA 聚合酶 __识别和结合的部位，能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需的__蛋白质__)、终止子、标记基因(作用：__为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来__，常用的标记基因是__抗生素抗性基因__等)。三、将目的...
