课题1DNA的粗提取与鉴定[学习目标]1.尝试粗提取植物或动物组织中的DNA。2.了解DNA的物理和化学性质。3.理解DNA粗提取与DNA鉴定的原理。知识点一DNA粗提取与鉴定的基础知识知识梳理1.提取DNA的基本思路(1)生物大分子的提取:选用一定的□物理或□化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。(2)DNA的粗提:利用DNA与□RNA、□蛋白质和□脂质等在□物理和□化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。2.提取DNA的原理(1)DNA的溶解性①DNA在NaCl溶液中的溶解度(如下图)DNA在□0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最小,DNA分子析出,其他杂质溶解;当NaCl溶液的浓度高于或低于此浓度时,DNA的溶解度都较高。②DNA在酒精溶液中的溶解性DNA□不溶于酒精溶液,但是细胞中的□某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步地分离。(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性①对酶的耐受性:蛋白酶能水解□蛋白质,但对□DNA没有影响。②对温度的耐受性:大多数蛋白质不能忍受□60~80_℃的高温,而DNA在□80_℃以上才会变性。③对洗涤剂的耐受性:洗涤剂能够瓦解□细胞膜,但对□DNA没有影响。3.DNA的鉴定在□沸水浴的条件下,DNA与□二苯胺反应呈现□蓝色。1.高温能使DNA和蛋白质均发生变性,高温对两者的作用机理相同吗?提示:不同。高温使蛋白质变性失活是由于高温破坏了蛋白质的空间结构,这种结构的破坏一般是不可逆转的;高温使DNA变性失活,是由于高温使DNA双链之间的氢键断裂,双链打开,降温后,双链结构还能恢复。所以DNA变性失活后,还能恢复活性。2.什么是蛋白质的盐溶和盐析?提示:一般在低盐浓度的情况下,蛋白质的溶解度随盐浓度的升高而增加,这种现象称为盐溶。而在盐浓度升高到一定值后,蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降低,结果蛋白质沉淀析出,这种现象称为盐析。典题分析题型一DNA与蛋白质理化性质的比较[例1]下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述正确的是()A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将DNA与蛋白质分离B.利用高温能使DNA变性,却对蛋白质没有任何影响的特性,可将DNA与蛋白质分离C.利用DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最大的特点,可将DNA与蛋白质分离D.在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA与蛋白质分离解题分析DNA不溶于酒精,而某些蛋白质等杂质溶于酒精,A错误;蛋白质比DNA对温度的耐受性更差,因此更容易变性,B错误;DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小,而蛋白质在该浓度的NaCl溶液中溶解度较大,因此可将DNA与蛋白质分离,C错误;嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解,而对DNA没有影响,因此,可将DNA与蛋白质分离,D正确。答案D题后归纳DNA与蛋白质在理化性质方面的比较知识点二DNA粗提取与鉴定的实验设计知识梳理1.实验材料的选取选用□DNA含量相对较□高的生物组织,如鸡血。2.破碎细胞,获取含DNA的滤液(1)动物细胞的破碎(以鸡血为例)在鸡血细胞液中加入一定量的□蒸馏水,同时用□玻璃棒搅拌,□过滤后收集□滤液即可。(2)植物细胞的破碎(以洋葱为例)先将洋葱切碎,然后加入一定量的□洗涤剂和食盐,进行□充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。3.去除滤液中杂质(1)方案一:通过控制□NaCl溶液的浓度去除□杂质。(2)方案二:直接向滤液中加入□嫩肉粉,反应10~15min,□嫩肉粉中的□木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。(3)方案三:将滤液放在□60~75_℃的恒温水浴箱中保温10~15min,注意严格控制温度范围,使□蛋白质沉淀,而□DNA分子还未变性,可以将DNA与蛋白质分离。4.DNA的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的□酒精这一原理,可从溶液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为□丝状。5.以鸡血为例提取DNA的实验步骤6.DNA的鉴定7.操作提示(1)哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核,不能作为提取DNA的实验材料;若选取肝脏细胞或植物细胞,则必须充分研磨。(2)盛放鸡血细胞液的容器最好是塑料器具,因为DNA容易被玻璃制品吸附,影响最终的DNA提取量。(3)搅拌时动作要轻缓,并沿同一方向,防止破坏DNA分子。(4)过滤含DNA的滤液时,不能用滤纸代替纱布,否则会因DNA吸附到滤纸上而损...