课题1DNA的粗提取与鉴定[学习目标]1
尝试粗提取植物或动物组织中的DNA
了解DNA的物理和化学性质
理解DNA粗提取与DNA鉴定的原理
知识点一DNA粗提取与鉴定的基础知识知识梳理1
提取DNA的基本思路(1)生物大分子的提取:选用一定的□物理或□化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子
(2)DNA的粗提:利用DNA与□RNA、□蛋白质和□脂质等在□物理和□化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分
2.提取DNA的原理(1)DNA的溶解性①DNA在NaCl溶液中的溶解度(如下图)DNA在□0
14mol/LNaCl溶液中的溶解度最小,DNA分子析出,其他杂质溶解;当NaCl溶液的浓度高于或低于此浓度时,DNA的溶解度都较高
②DNA在酒精溶液中的溶解性DNA□不溶于酒精溶液,但是细胞中的□某些蛋白质则溶于酒精
利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步地分离
(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性①对酶的耐受性:蛋白酶能水解□蛋白质,但对□DNA没有影响
②对温度的耐受性:大多数蛋白质不能忍受□60~80_℃的高温,而DNA在□80_℃以上才会变性
③对洗涤剂的耐受性:洗涤剂能够瓦解□细胞膜,但对□DNA没有影响
3.DNA的鉴定在□沸水浴的条件下,DNA与□二苯胺反应呈现□蓝色
高温能使DNA和蛋白质均发生变性,高温对两者的作用机理相同吗
高温使蛋白质变性失活是由于高温破坏了蛋白质的空间结构,这种结构的破坏一般是不可逆转的;高温使DNA变性失活,是由于高温使DNA双链之间的氢键断裂,双链打开,降温后,双链结构还能恢复
所以DNA变性失活后,还能恢复活性
2.什么是蛋白质的盐溶和盐析
提示:一般在低盐浓度的情况下,蛋白质的溶解度随盐浓度的升高而增加,这种现象称为盐溶
而在盐浓度升高到一定值后,蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降低,结果