第1页共22页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共22页中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心教案授课科目:医学分子生物学授课内容:基因治疗授课对象：临床医学七年制、八年制授课时数：4学时授课教师：授课地点：湘雅医学院新教学区授课时间：授课教材：医学分子生物学（21世纪高等院校教材），胡维新主编，北京：科学出版社，2007年2月，第一版；医学分子生物学（卫生部8年制规划教材），冯作化主编，北京：人民卫生出版社，2005，第一版一．目的要求掌握：基因治疗的概念、基本策略、常用载体；治疗基因的受控表达原理与方法。熟悉：基因转移的基本技术；基因干预的基本策略；基因治疗的应用研第2页共22页第1页共22页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第2页共22页究。了解：基因转移的靶细胞;基因治疗的前景与问题；人类生殖细胞基因治疗研究的伦理学问题。二．讲授重点：基因治疗的策略：如基因置换、基因添加、基因干预、自杀基因治疗、免疫基因治疗等；体内基因转移的方法。三．讲授难点：不同类型的疾病应采用不同的治疗策略；基因干预方法与原理；治疗基因的受控表达原理与方法。四、教学方法：多媒体教学五、教具：多媒体课件六、讲授内容：何谓HumanGeneTherapy？基因治疗是现代分子生物学技术与医学科学交叉渗透而形成的一个全新治疗领域。DNA重组、基因转移、基因克隆和表达等技术的迅猛发展，为基因治疗的飞速发展奠定了基础。基因治疗分类体细胞(somaticcell)基因治疗只限于某一体细胞的基因的改变只限于某个体的当代生殖细胞(germline)基因治疗对缺陷的生殖细胞进行矫正当代及子代第一节基因治疗的策略1．基因治疗的概念定义：将目的基因导入靶细胞内，成为宿主细胞遗传物质的一部分，目的基因表达产物对疾病起治疗作用。不同的基因治疗策略是以不同的形式利用基因产生治疗效应，因而适用于不同疾病的治疗。2．基因置换（genereplacement）定义：指将特定的目的基因导入特定细胞，通过定位重组，以导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因。又称基因矫正（genecorrection）。目的：纠正缺陷基因，将缺陷基因的异常序列进行矫正，对缺陷基因的缺陷部位进行精确的原位修复，不涉及基因组的其他任何改变。基因置换的必要条件：对导入的基因及其产物有详尽的了解；外来基因能有效地导入靶细胞；导入基因能在靶细胞中长期稳定存在；导入基因能有适度水平的表达；第3页共22页第2页共22页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第3页共22页基因导入的方法及所用载体对宿主细胞安全无害。基因同源重组技术（homologousrecombination)又称为基因打靶(genetargeting），其实现定点整合的条件:转导基因的载体具有与染色体上的DNA相同的序列。这样，带有目的基因的载体就能找到同源重组的位点进行部分基因序列的交换。要实现基因置换，需要采用同源重组使相应的正常基因定向导入受体细胞的基因缺陷部位。定向导入的发生率约1/100万，采用胚胎干细胞培养的方法，这种同源重组的检出率最高可达1/10。考虑到正常体细胞的生命周期，以及克隆筛选等实验给细胞生长带来的一系列问题尚未解决．因此用同源重组修复异常基因的方法进行遗传病的基因治疗只能作为远期目标。3．基因添加基因添加或称基因增补（geneaugmentation）:通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。类型:针对特定的缺陷基因导入其相应的正常基因，使导入的正常基因整合到基因组中，而细胞内的缺陷基因并未除去，通过导入正常基因的表达产物，补偿缺陷基因的功能；向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因，利用其表达产物达到治疗疾病的目的。基因添加与基因置换一样，也必须具备上面提到的5个必要条件。4．基因干预基因干预（geneinterference）:采用特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因的结构而使之不能表达，以达到治疗疾病的目的。此类基因治疗的靶基因往往是过度表达的癌基因或者是病毒的基因。较常用的方法是采用反义核酸、核酶或者干扰RNA技术等抑制基因的表达。5．自杀基因治疗恶...
