土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课时2授课班级考点、知识点筛选的原理：分离：计数学习目标1.分离微生物的原理2.利用选择培养基分离细菌3.统计细菌数目的方法重、难点.教学重难点：2.利用选择培养基分离细菌3.统计细菌数目的方法教学过程教学内容学生活动1.微生物的营养:2.培养基的制备:3.无菌操作技术:4.接种方法:一．基础知识尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶。复习微生物培养的基础知识（回忆)学生阅读课题背景交流表述尿素的特点及作用二.筛选菌株提问:生物与环境之间的关系?生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用特殊的培养基能筛选出特殊的微生物吗?本课题实验使用的培养基的特点与功能是什么呢?三.统计菌落数目常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。1.为什么是活菌数?2.怎么计算?在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。除此之外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法四.设置对照1.怎么设置对照说明培养基是无菌的?2.怎么设置对照说明培养基发挥了选择功能?阅读筛选菌株,思考问题,回答.阅读后思考回答问题分析思考和回答.阅读分析思考3.怎么设置对照说明菌落数是有效的?五.实验设计:1.有哪些重要环节?取样稀释涂平板培养与观察计数鉴定2.各环节需要哪些工具?3.操作时注意的问题?土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。1）应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。2）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。和回答.阅读分析思考和回答3）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。4)为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。4.怎么鉴定?在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。总结：课堂练习1.利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是A．酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌B．酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌引导学生归纳记忆课堂练习实验方案土壤中尿素分解菌的分离与计数分离筛选微生物的原理有利于目的菌株生长抑制或阻止其他微生物生长人为条件微生物计数方法与原理稀释涂布平板法显微镜直接计数对照设置与重复设置实验设计实验操作结果与分析D．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌2．下列操作不属于微生物的分离步骤的是A．稀释B．划线或涂布C．接斜面D．培养3．影响微生物生长的主要环境因素是A．阳光、温度、水分B．温度、水分、PHC．水分、PH、氧D．温度、PH、氧4.下列微生物的产物中没有菌种特异性的一组是A．氨基酸、核苷酸、多糖、色素B.多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基酸C．核苷酸、多糖、维生素、毒素、抗生素D．核苷酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸5．微生物代谢的人工控制是指A.改变微生物的遗传特性B.控制发酵时的温度C.调节发酵过程中的pH，氧气通入量D.包括A、B、C三项
