第37讲克隆技术[考试标准]知识内容加试要求二、克隆技术1.植物的克隆2．动物的克隆ba考点一植物的克隆1．植物组织培养(1)理论基础：植物细胞的全能性。(2)程序：半固体培养基的配制→小组织块的切取→愈伤组织的获得→新植株的再生。2．植物细胞培养和器官培养的措施通过平衡的植物激素配比进行调控。(1)适量的激动素和细胞分裂素配比，可诱导芽的分化。(2)适量的吲哚乙酸及适当减除其他某些激素，可诱导生根。3．原生质体培养与植物细胞工程(1)原生质体的获得方法：在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液环境(较高渗透压)下，用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞，除去细胞壁，获得球形的原生质体。(2)植物细胞工程的操作过程外源遗传物质――→转基因细胞――→新植株(3)细胞产物的工业化生产：生产一些重要的细胞次生代谢产物(如某些中药)。[诊断与思考]1．判断下列叙述的正误(1)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性(√)(2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性(×)(3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化(×)(4)愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的(×)(5)用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性(×)2．完善植物组织、细胞、器官培养和原生质体培养的关系3．完善植物细胞工程的操作过程流程图题组植物组织培养及植物克隆的应用1．下列关于植物克隆的叙述，错误的是()A．通过花药离体培养可获得单倍体B．通过平衡植物激素种类可实现器官发生C．可利用细胞培养生产人参皂甙等中药成分D．对植物愈伤组织进行诱变、培育和筛选可获得新品种答案B解析通过平衡植物激素配比可调控器官发生和形态建成。2．下图表示植物组织培养过程。据图分析下列叙述正确的是()A．⑤植株根尖细胞的全能性比①植株根尖细胞的强B．②试管的培养基中含有植物生长调节剂，不含有机物C．③试管中的细胞具有细胞质丰富、细胞核和液泡都大的特性D．调节④培养基中植物生长调节剂的比例可诱导产生不同的植物器官答案D解析由于⑤是由①上的组织经培养形成的个体，故二者的全能性应该相同，A错；由①到②的过程中植物细胞不能进行光合作用，因而②试管中含有有机物如蔗糖等，故B错；③试管中细胞为愈伤组织细胞，液泡小，故C错。具有全能性≠体现(实现)全能性(1)具有全能性：理论上，活细胞都具有全能性。(2)体现全能性：只有发育成完整个体，才能说明实现了细胞的全能性。考点二动物的克隆1．动物细胞、组织培养(1)动物克隆的技术基础是动物的细胞和组织培养。(2)动物细胞培养的过程：动物细胞培养包括组织块的切取、组织细胞的分散及细胞培养三个阶段。分散组织细胞常用的方法有机械消化法和胰酶消化法。(3)原代培养和传代培养的含义①原代培养：从机体取出后立即进行的细胞、组织培养的过程。②传代培养：将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。(4)动物成纤维细胞的培养过程：切取组织小片→胰蛋白酶酶解→原代培养→传代培养。2．细胞系和细胞株(1)细胞系的类型：连续细胞系(恶性细胞系：具有异体致瘤性；不死性细胞系：保留接触抑制现象，不致癌)和有限细胞系。(2)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞。可分为连续细胞株和有限细胞株。3．克隆培养法(1)概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。(2)基本要求：必须肯定所建成的克隆来源于单个细胞。(3)提高细胞克隆形成率的措施有：①选择适宜的培养基；②添加血清；③以滋养细胞支持生长；④激素刺激；⑤使用CO2培养箱；⑥调节pH。4．动物的细胞融合技术及其应用(1)细胞融合①概念：是指在一定的条件下将2个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。②原理：细胞膜的流动性。③诱导融合的方法a．物理方法和化学方法：电激法、聚乙二醇等。b．生物方法：灭活的病毒(如仙台病毒)。(2)细胞杂交①概念：基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交。②过程③应用：由于细胞杂交中染色体容易丢失，利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物...
