基因工程简介【基础知识回扣】一、基因工程的基本内容：⑴、基因工程：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，______改造生物的遗传性状。又叫______技术或______技术⑵、基因操作的工具A、限制性内切酶（基因剪刀）①分布：主要存在于______中②作用与特性：一种限制酶只能识别______的核苷酸序列，并且能在______上切割DNA分子③结果：产生黏性末端④种类：200多种B、DNA连结酶（基因针线）把两条DNA黏性末端之间的缝隙“缝合”起来运载体（基因的运输工具）。具备条件：①够在宿主细胞中______并______保存②具有多个______切点，以便与外源基因连接③具有某些______，便于进行筛选______常用运载体：______、噬菌体、动植物病毒⑶、基因操作的基本步骤A、提取目的基因概念：取得人们所需要的特定基因途径：直接分离基因，如______人工合成基因①mRNA单链DNA双链DNA②根据已知的氨基酸序列，推测出核苷酸序列，通过化学方法合成B、目的基因与运载体结合用一定的______切割质粒用______限制酶切割目的基因加入DNA连接酶二者的黏性末端因碱基互补配对而结合成重组DNA分子C、将目的基因导人受体细胞；主要是借鉴______或______侵染细胞的途径D、目的基因的检测和表达检测：根据______是否具有某些______，判断目的基因导人与否表达：受体细胞表现出______二、基因工程的成果与发展前景⑴、基因工程与医药卫生①、生产基因工程药品：如胰岛素、干扰素等②、基因诊断：用放射性同位素、荧光分子等标记的做探针，应用______原理，鉴定被检测标本上的遗传信息③、基因治疗：把______导人有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的⑵、基因工程与农牧业及食品工业：A、农业获得高产、稳产和具有______的农作物培育具有各种______的作物新品种B、畜牧养殖业培育人们所需要的具有各种优良品质的______动物利用某些特定的______在哺乳动物体内______表达C、食品业：为人类开辟新的食物来源⑶、基因工程与环境保护环境监测：用______检测______的含量环境净化：获得能同时分解四种烃类的“超级细菌”【核心要点突破】一、基因的的操作工具1．限制性内切酶(1)分布：该酶主要分布于微生物中。(2)作用：基因工程中重要的切割工具，能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。(3)作用部位：在DNA分子内部进行。(4)特点：具特异性，即识别特定的核苷酸序列，并在特定切点切割。该酶识别的切割部位一般都具有反向重复序列，即一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。切割方式举例如下：思考：要想获得某个特定性状的基因必须要用限制性内切酶切几个切口?可产生几个黏性末端?2．DNA连接酶：该酶的作用是将两个相同的黏性末端连接起来，连接的部位是磷酸二酯键(梯子的扶手)，不是氢键(梯子的横档)。3．运载体(1)在基因操作中，使用运载体的目的有两个：①作为运载工具，将目的基因运送到宿主细胞中去。②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。(2)作为运载体必须具备三个条件：①能在宿主细胞内稳定地保存并大量复制。②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接。③具有某些标记基因，以便进行筛选。【特别提醒】①限制性内切酶和DNA连接酶的作用部位都是脱氧核苷酸之间形成的磷酸二酯键，只是一个切开，一个连接。②质粒是最常用的运载体，不要把质粒同运载体等同，除此之外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。二、提取目的基因的方法比较过程优点缺点直接分离法（鸟枪法）供体细胞的DNADNA片段不同的受体细胞DNA片段扩增含目的基因的细胞基因操作简便工作量大，有盲目性，目的基因含不表达的内含子人工合成的方法反转录法①mRNA单链DNA双链DNA专一性强，目的基因不含内含子操作麻烦，mRNA存在的时间短，技术要求高据已知氨通过测出的核苷酸序列，通过化学方法合成专一性最强，目的基因不含内含子，目前，复杂的尚不知核苷酸基酸序列合成可以可以自然界中不存在的基因序列的基因不能合成【特别提醒】由于一种氨基酸可对应多种密码子，因此根据蛋白质中已知的氨基酸序列合成出的目的基因可能有多种，但这并不影响目的基因表达...
