月季的花药培养课标点击1、说明花药离体培养的基本原理和影响花药培养的因素。2、说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。3、学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。课题重点、难点1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。2．选取适宜的培养材料和培养基。自主探究知识点观察与思考归纳与总结被子植物的花粉发育仔细阅读P37~P38页，思考并回答被子植物的雄蕊通常包含、两部分。花药为囊状，内部含有许多花粉。花粉是由细胞经过而形成的，因此，花粉是倍体的生殖细胞。被子植物花粉的发育要经历、和等阶段。其中期又分为期和单核靠边期两个时期。双核期双核包括和核，进而形成两个细胞，一个是细胞，一个是细胞花粉粒形成精子还要经过过程。产生花粉植株的两种途径仔细阅读P38页，思考产生花粉植株总共有哪两种途径？通过花药培养产生花药植株（即单倍体植株）有两种途径：一种是花粉通过阶段发育为植株，一种是花粉在诱导培养基上先形成，再将其诱化成植株。具体过程如下：途径1：花药中的花粉——→—→→生根什么是胚状体？→移栽途径2：花药中的花粉——→——→→生根→移栽胚状体是指在植物组织培养过程中，在植物组织块或愈伤组织上产生的一种结构，它与正常受精卵发育形成的胚有类似的结构和发育过程。影响花药培养的因素阅读P38，思考并总结影响花药培养的因素有哪些？诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中与是主要的影响因素。花期一般是指一个生长季内植物开花的时间段。花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的期。并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或者胚状体，一般来说，在期，细胞核的时期，花药培养成功率最高。为了选择期的花药，通常选择花蕾。知识点观察与思考归纳与总结试验操作一、材料的选取仔细阅读P39，思考：在选择花药时都采用什么方法?在选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法。但是某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色二、材料的阅读P39最后一段，通常先将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡大约30s，消毒体会材料是怎样消毒的立即取出，在无菌水中清洗。取出后再用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分，放入质量分数为0.1%的绿化汞溶液中2~4min（也可用质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液），取出后再用无菌水冲洗3~5次三、接种和培养阅读P40，思考接种和培养的过程中应该注意哪些问题灭菌后的花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成通常每瓶接种花药7~10个，培养温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20~30d培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或者胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化，因此还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选
