第84页共14页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第84页共14页第八章配子与胚胎生物技术第一节胚胎移植技术一、概述(一)概念(记忆,P253)胚胎移植(embryotransfer,ET):又称借腹怀胎,受精卵移植。它是将体内(优秀母畜)、外生产的哺乳动物早期胚胎(一般情况下所移植的不是受精卵,而是发育至多细胞桑椹胚或胚泡阶段的胚胎),(如果是体外内胚胎用手术或非手术的方法取出,在显微镜性下检出后),移植到同种的生理状态相同的雌性动物生殖道内,使之继续发育为正常个体的生物技术。提供胚胎的个体——供体(donor)接受胚胎的个体——受体(recipient)F超数排卵和胚胎移植通常同时应用,合称超数排卵和胚胎移植(multipleovulationandembryotransfer,MOET),简称MOET技术(记忆,P209)(二)发展历史(熟悉,P209-211)1、试验研究阶段2、实际应用阶段3、产业化阶段(三)胚胎移植在畜牧业生产上的意义(P256,记忆)1、提高良种母畜繁殖力;2、简化良种引进方法;3、降低种质资源保护利用;4、加速育种进程;5、利于防疫;在养猪业中,为了培育无特异性病原体(SPF)猪群,向封闭群引进新的个体时,作为控制疾病的一种措施,采用ET技术剖腹取仔的方法。6、促进生殖生理理论与胚胎生物技术的发展二、ET的生理学基础与基本原则(一)生理学原理(书P212,记忆)1、母畜发情后生殖器官的孕向发育母畜发情后数日甚至10余日内,生殖系统的变化相同,即在相同的时期,生理状态一致,子宫内的环境相同。2、早期胚胎的游离状态游离状态是胚胎采集、保存、培养和体外操作等重要理论基础。3、子宫对早期胚胎的免疫耐受性即胚胎移植不存在免疫问题。第85页共14页第84页共14页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第85页共14页4、胚胎遗传物质的稳定性胚胎的遗传特性不受受体母畜的影响。(二)ET遵循的基本原则(P212-213,记忆)1、胚胎移植前后所处环境的同一性(1)供体和受体在分类学上的属于同一物种;(2)胚胎发育阶段与受体发情时间上的一致性;(3)胚胎发育阶段与受体生殖道解剖位置的一致性。2、胚胎发育的阶段。ET时间应在妊娠时别发生之前,通常在供体发情配种后3~8d内收集胚胎,受体也在相同时间接受ET。3、胚胎的质量。保证质量。4、经济效益或科学价值。供胚应具独特经济价值,而受体要求生产性能一般,但繁殖性能良好,环境适应能力强。(三)ET应具备的条件(熟悉,P213)1、实验室条件2、技术条件3、胚胎来源二、胚胎移植的技术(记忆)(一)供、受体母畜的选择(P214)1、供体母畜健康,较高育种价值,生殖机能正常,已证明对超排反应较好。2、受体母畜健康、繁殖性能良好,体型较大。(二)受体母畜的同期发情(P214)同第四章第七节(三)供体母畜的超排(P214-216)1、超排方法(前已说)2、提高超排效果的措施(选择对象、规范化管理、优质药品)(四)供体母畜的配种(P216)适当的时间,优质精液对供体母畜进行输精。使用密度大、活率高的精液输精,输精次数2-3次,间隔8-10h。第86页共14页第85页共14页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第86页共14页(五)胚胎采集(冲卵)(P216-219)定义:是利用特定的溶液和装置将早期胚胎从母畜子宫或输卵管中冲出并回收利用的过程。1、冲胚液的配制与灭菌:含5%犊牛血清的杜氏磷酸盐缓冲液(D-PBSS)。2、冲胚器械用途和准备(1)二路式或三路式冲胚管;(2)外科手术器械。(3)保定架(4)必备药品3、供体母畜的检查与处理供体牛在发情的第5-6d通过直检卵巢上黄体数,确定进行冲胚处理的牛的头数。两侧上有2个或2个以上的黄体才冲胚,冲胚时间在发情第7d进行。4、胚胎的收集(时间、方法)胚胎收集时间(记忆):配种后3-8d后,发育至4-8细胞胚以上为宜(大多数动物)或桑葚胚或早期囊胚(配种后6-8d)(牛和水牛)收集胚胎的方法(记忆)(1)手术法(小动物和实验动物)在腹中线处作一切口,然后将子宫角和卵巢一起拉出,检查排卵点或血红体数量。冲胚方式采取:输卵管采胚法(于羊和兔);子宫角采胚法(于羊、猪和兔等...