香菇中糖类物质的分离与测定2VIP免费

香菇中糖类物质的分离与测定摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用SepharsoseCL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量SeparationandDeterminationofcarbohydratesinLentinusedodesAbstract：Thisexperimentextractsoflentinan(LentinanLNT)byusinghotwaterextractionandethanolalcoholprecipitationmethod.Theorthogonalmethodtogettheoptimumextractionofpolysaccharidesisthebestprogram,resultingpolysaccharidesrecoveryof14.05%,andthentogetcrudepolysaccharidequalitativeandquantitativeanalysis.ByusingPhenol-sulfuricacidmethod,extractedpolysaccharidessingleoligosaccharidesandpolysaccharidescontentwas35.9%;TLCandpaperchromatographyanalysismonosaccharidecomposition,themonosaccharidecomposesmostlyofglucoseandarabinose;RelativemolecularweightofpolysaccharidedeterminedbySepharsoseCL-6Bcolumnchromatographyisabout5597.58daltons.Theresultsofgaschromatographicanalysisofamonosaccharideisgalactose,glucose,arabinose,fucose,sugar,andothertypesofmonosaccharidesinthelentinan.galactoseandglucosearemuchmoreamongthem.Keywords：Lentinan;Recoveries;Content;Composition;Relativemolecularweight0引言：糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。而糖生物学研究对揭示生命本质，实现中药现代化，深入开发中药资源有着重要的意义。但是,目前多糖的研究主要以陆生植物为主,有些源于名贵中药,这不利于多糖应用与研究的进一步发展。因此物美价廉的香菇受到越来越多的关注。香菇（Lentinusedodes）是侧耳科（Plearataco）的担子菌，含有多种有效药用成分。尤其是香菇多糖（Lentinan，LNT）是一种宿主免疫增强剂（Hostdefense-tiator，HDP），它具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能。本团队以热水提取法获得香菇多糖（Lentinan，LNT），并对其理化性质，含量和组成进行了一定规模的研究分析，为香菇多糖的开发与利用提供了实验依据。1材料与方法1.1实验材料1.1.1材料：香菇1.1.2试剂（1）无水乙醇（2）无水乙醚（3）P2O5（4）浓硫酸（5）6%苯酚（6）葡萄糖（7）BaCO3（8）显色剂：苯胺-邻苯二甲酸正丁醇饱和水溶液展层剂：正丁醇：乙醇：水=4:1:5（体积比）标准糖样：甘露糖、木糖、半乳糖、葡萄糖等琼脂糖凝胶（12）洗脱液：生理盐水（9g/ml）蓝色葡聚糖及不同相对分子质量葡聚糖标准样1.1.3仪器（1）电子天平（2）烧杯（3）玻璃棒（4）恒温水浴锅（5）纱布（6）容量瓶（7）真空干燥器（8）分析天平（9）移液管（10）可见光分光光度计（11）水解管（12）滤纸（13）漏斗（14）毛细管（15）硅胶板（16）层析缸（17）烘箱（18）喷雾剂（19）层析柱1cm×90cm（20）恒流泵（21）记录仪（22）自动部分收集器（23）紫外检测仪1.2香菇中多糖的提取称取晒干的香菇30.32g，用剪刀剪碎成小块，用自来水浸泡约24h后，在80℃下煮提1.5h，用纱布过滤取滤液至铁钢中，再加入少量水按以上方法分别煮提1h、0.5h，将3次得到的滤液在120℃下浓缩至50ml以下，转移至两成为250ml烧杯中，加入3倍体积95%乙醇中，封上封口膜保存。醇沉后倒出上清，将沉淀3000r/min离心15min，取出沉淀，沉淀依次用无水乙醇、乙醚脱水，P2O5真空干燥过夜，即得粗多糖。1.3香菇中单寡糖与多糖的含量测定游离的单寡糖多糖中的己糖、糖醛酸在浓硫酸作用下，可脱水生成糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物。己糖...