基因工程试卷B一．名词解释（每个2分，共20分）1、转化:2、质粒转移性:3、DNA文库:4、RACE:5、选择标记基因:6、降落PCR7、载体:8、感受态细胞:9CaMV35s:10、ORF:二、选择题（每题1分，共15分）1()限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组C强化自身的核酸代谢D提高自身的防御能力2()生物工程的下游技术是A基因工程及分离工程B蛋白质工程及发酵工程C基因工程及蛋白质工程D分离工程及蛋白质工程3()基因工程操作常用的酶是:(I内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶A.I+IIB.I+III+IVC.II+III+IVD.I+II+IV+III4()限制性内切核酸酶的星活性是指：A在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。B活性大大提高C切割速度大大加快D识别序列与原来的完全不同5()下列五个DNA片段中含有回文结构的是A.GAAACTGCTTTGACB.GAAACTGGAAACTGC.GAAACTGGTCAAAGD.GAAACTGCAGTTTC6()关于cDNA的不正确的提法是：A同mRNA互补的单链RNAB同mRNA互补的含有内含子的DNAC以mRNA为模板合成的双链RNAD以上都不正确7()下列有关连接反应的叙述，错误的是A.连接反应的最佳温度为37℃B.连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C.连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD.连接酶通常应过量2-5倍8()T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是A.2'-OH和5'–PB.2'-OH和3'-PC.3'-OH和5'–PD.5'-OH和3'-P9()载体的功能是A.外源基因进入受体的搭载工具B.不能为外源基因提供整合能力C.不能提供复制能力D.不能为外源基因提供表达能力10()黏性末端连接法，不仅操作方便，而且A产生新切点B易于回收外源片段C载体不易环化D影响外源基因的表达11()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)Dλ噬菌体12()考斯质粒（cosmid）是一种A.容量最大一种载体B.由λ-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.是一种单链DNA环状载体D.不能在受体细胞内复制，但可以表达13()某一重组DNA的载体部分有两个BamHI酶切位点。用BamHI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的BamHI酶切位点共有A.4个B.3个C.1个D.2个14()下列哪一种酶作用时需要引物?A限制酶B末端转移酶C反转录酶DDNA连接酶15用下列方法进行重组体的筛选，只有()说明外源基因进行了表达。(a)Southem印迹杂交(b)Northem印迹杂交(c)Western印迹(d)原位菌落杂交三、简答题（每题5分，共25分）1、简述获得目的基因常用的几种方法。2、什么是α-互补筛选？3、简述酶切反应体系及反应条件？4、核酸操作的基本技术有哪些？5、限制性核酸内切酶有几种类型？常用是哪种类型并简述其特性。四、论述题（每题10分，共40分）1论述重组子的筛选和鉴定常用的方法。2基因工程基本操作程序。3试述5′RACE技术原理和方法4试举例说明基因工程中为什么常用大肠杆菌作为工程菌？基因工程试题标准答案及评分标准B一、选择题（每题1分，共15分）1、D2、A3、A4、D5、D6、C7、A8、C9、D10、C11、C12、B13、D14、C15、C二、名词解释（每题2分，共20分）1、严格地说是指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程2、质粒不亲和性：在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。3、cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。4、RACE：是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3，或5，端之间未知序列的方法。5、基因文库：通过克隆方法保存在适当宿主中的某种生物，组织，器官或细胞类型的所有DNA片段而构成的克隆集合体。6、RT-PCR:先用逆转录酶作用于mRNA，以寡聚dT为引物合成cDNA第一链，然后用已知一对引物，扩增嵌合分子，这种方法称为逆转录PCR7、载体：指基因工程中携带外源基因进入受体细胞的运载工具，它的本质是DNA复制子。8、S-D序列：在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上，含有一个转译起始密码子及同16S核糖体RNA3，末端碱基互补的序列，该序列最初由Shine、Dalgarno发现，...
