VEGF对非小细胞肺癌转归的影响VIP免费

VEGF对非小细胞肺癌转归的影响中国武警医学院附属医院肿瘤中心穆海玉第一页，共二十六页。前言肺癌是当今世界上对人类健康和生命危害最大的恶性肿瘤，随着传统化疗进入了一个平台期，靶向治疗引起人们的高度关注。实验显示新生血管生成是肿瘤生长与转移的解剖学和生理学根底，因此研究可能影响肺癌血管生成的因素，寻找有效的抗血管生成药物，可望在很大程度上改变肺癌治疗的现状。研究显示：血管内皮生长因子〔vascularendothelialgrowthfactorVEGF〕是肺癌血管生成的关键因素。本实验采用SP免疫组织化学方法，检测肺癌组织中VEGF的阳性表达，分析研究它与微血管密度〔microvesseldensityMVD〕之间的关系及与临床病理、组织分型和转移之间的联系，以探讨VEGF在肺癌血管生成中的作用。第二页，共二十六页。对象及分组〔1〕肺癌组：共40例，平均年龄52.6岁，其中男21例，女19例。所有患者术前均未接受放化疗。所有标本均重新切片后经HE染色证实为肺癌。其中鳞癌21例，腺癌14例，小细胞未分化癌5例；高分化20例，中分化7例，低分化8例；Ⅰ期＋Ⅱ期21例，Ⅲ期＋Ⅳ期14例。〔2〕肺良性病组：共12例，男9例，女3例；平均年龄49.8岁。标本重新切片后经HE染色证实7例为结核球、5例为肺炎。〔3〕正常对照组：共10例，男6例，女4例；平均年龄47.6岁。经HE染色证实为正常肺组织。第三页，共二十六页。方法所有石蜡标本均行5切片，连续切4片，置60度烤箱内烤30分钟。所有切片分别经二甲苯脱蜡，无水酒精及其它不同浓度酒精脱苯，自来水洗2分钟水化。必选一张切片行HE染色核实病理诊断。采用SP免疫组织化学染色法，按药盒操作规程进行。以PBS代替一抗作阴性对照，用武汉博士德生物工程有限责任公司提供的能看出阳性切片作阳性对照。第四页，共二十六页。结果判定VEGF表达的判定：镜下癌细胞浆呈棕黄色颗粒状者为阳性，细胞浆呈透明或无色者为阴性，每张切片中观察5个高倍视野〔200×〕，每一视野记数100个细胞，阳性染色细胞＜10%为阴性，≥10%为阳性。第五页，共二十六页。MVD的测定：参考Weidner方法，先在低倍镜下扫视整个切片，确定对FⅢAg明显着棕褐色微血管密度最高区，即“热点〞。然后换成高倍镜进行记数。凡在肿瘤组织中与邻近微血管、肿瘤细胞及其它结缔组织分界清楚的任何一个染成棕褐色的细胞或细胞簇均被认为是一个血管；只要结构不相连，其分枝结构也算作一个血管。但不能用有无红细胞的出现及是否形成管腔来记数血管数。已形成明显肌层的血管不参与计数，结果以3个视野血管的均数表示。第六页，共二十六页。计量资料数据采用均数±标准差表示，所得数据采用t检验和方差分析；计数资料采用x2检验。统计学处理第七页，共二十六页。结果1---三种肺组织中MVD分布情况阳性染色局限于血管内皮细胞膜，呈棕褐色，微血管形态不规那么，在癌组织中的分布呈异质性，大多集中在肿瘤边缘。第八页，共二十六页。nMVD肺癌组4020.78±5.86良性组126.83±1.23正常组105.20±1.13P值P良=0.003P正=0.002表1MVD在三种肺组织中的表达第九页，共二十六页。VEGF着色为棕黄色颗粒，阳性染色主要分布于癌细胞胞浆中，在肿瘤坏死灶周围尤为明显。肺癌组织VEGF阳性率显著高于肺良性病变和正常对照组。见表2结果2--VEGF在三种肺组织中的表达第十页，共二十六页。例数VEGF+VEGF-P值肺癌402515P癌症-良性=0.014肺良12210P癌症-正常=0.001正常10010P良性-正常=0.542表2VEGF在三种肺组织中的表达第十一页，共二十六页。结果3–MVD、VEGF表达与临床参数之间的关系MVD与原发肿瘤大小、组织学分级、淋巴转移有关，而与病理分型无关，见表3。VEGF与原发肿瘤大小、淋巴转移有关，而与组织学分级、病理分型无关，见表3。第十二页，共二十六页。临床病理特征NMVDPVEGFP+-肿瘤大小≤5cm1917.16±4.110.0031180.021＞5cm1625.63±4.77142组织学分级高2017.35±4.220.0001370.629中723.14±4.380.023520.897低828.25±4.2071病理分型鳞癌2120.24±56.10.721470.504腺癌1422.21±6.74113淋巴结转移有1326.62±4.580.0021210.02无2217.73±4.13139表3非小细胞肺癌MVD、VEGF表达与临床参数之间的关系第十三页，...