互动课堂疏导引导1
体外受精技术哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等主要步骤
(1)卵母细胞采集的方法和操作的要领第一种方法:对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等卵母细胞采集时,可先用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后在适当的时间从输卵管冲取卵子,并使其直接与获取的精子在体外受精
第二种方法:从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞
第三种方法:直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞,叫活体采卵
需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞
后两种方法适用于大家畜和大动物
采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精
(2)精子采集的具体方法及要求主要分为假阴道法、手握法和电刺激法
假阴道法是用特制的假阴道,满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求
同时要配备有与供精动物相适应的台畜,训练动物爬跨台畜,借假阴道收集精液
手握法是通过徒手或戴乳胶手套的手,直接把握雄性动物阴茎,施以适当压力和刺激即可引起射精,并可收集富含精子的精液
电刺激法是采用特制的电极伸入动物的直肠直接刺激位于腰荐部的射精中枢引起射精,此方法只适用于野生或某些经济动物
此外,对于啮齿类的实验动物可在处死后从附睾尾收集精液
(3)精子获能的处理方法在体外受精前,精子必须先进行获能处理,方法有:①培养法:对于啮齿类动物、家兔和猪等动物的精子,将取自附睾的精子,放入人工配制的获能液中,培养一段时间后,精子就可获能,称为培养法
②化学诱导法:对于牛、羊等家畜的精子,将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导精子获能,称之为化学诱导法
(4)受精获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程
受精与胚胎的早期培养精子和卵子受精后,应将受