细菌感染的检测实验二细菌的生长繁殖、消毒与灭菌一、讨论：1、消毒灭菌的方法、实验室生物安全2、细菌的人工培养：培养基、细菌培养技术、细菌生长现象二、示教：1、消毒灭菌的常用方法2、药敏实验3、培养基制备、种类、用途4、细菌生长现象观察三、操作：细菌的接种（液体、半固体、固体培养基）(一）消毒灭菌方法、实验室生物安全1.常用术语消毒(disinfection)：利用理化因素杀死物体或环境中病原微生物的措施。并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物灭菌(sterilization)：利用理化因素杀死物体上所有微生物的过程，包括芽胞。无菌操作（aseptictechnique)：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。（2）常用方法物理消毒灭菌法：热力灭菌法：干热灭菌法、湿热灭菌法辐射杀菌法：电离辐射--X、β、γ射线非电离辐射--紫外线、日光、微波滤过除菌法：滤过除菌法干燥低温抑菌法：抑菌和灭菌化学消毒灭菌法：生物消毒灭菌法热力灭菌法干热灭菌焚烧、烧灼、红外线干烤（160~170℃/2h）热力灭菌法湿热灭菌巴氏消毒法：62℃30min或72℃30sec煮沸法30min流动蒸气消毒法间歇蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法：121℃,1.05Kg/cm2(15个大气压),20min辐射杀菌法①电离辐射：X、β、γ射线原理:通过产生OH－、O2等活性游离基进行杀菌；通过破坏DNA的结构导致菌体死亡②非电离辐射：紫外线、微波、超声波、日光辐射杀菌法：非电离辐射ⅰ.紫外线：200～300nm日光(最佳：265～266nm)原理：导致DNA分子构型改变DNA复制出现差错用途：只用于空气和物品表面的消毒（注意防护）ⅱ.微波：细菌体内的蛋白质、核酸等分子在微波场下高速旋转、振动，细菌蛋白质凝固、核酸变性而死亡。常用于对非金属器械的消毒，优点是无污染而且迅速。ⅲ.超声波是指频率大于20kHz的声波，其频率高，波长短，定向性好，穿透力强。原理：空化作用用途：液体或可放置液体中不影响其性能的物品滤过除菌法贝克菲滤器蔡氏滤器玻璃滤器膜滤器孔径0.22um-0.45um除菌空气过滤器:无菌棉花、活性炭及细玻璃纤维等可对空气进行过滤除菌2、化学消毒灭菌法常用消毒剂(disinfectants)的杀菌机制使菌体蛋白变性或凝固干扰微生物酶系统和影响其代谢损伤细胞壁、细胞膜环氧乙烷消毒设备化学消毒灭菌法高效消毒剂high-level中效消毒剂intermediate-level低效消毒剂low-level可杀死包括细菌芽胞在内所有微生物不能杀死芽胞，可杀死细菌繁殖体、真菌、大多数病毒可杀死大多数细菌繁殖体，对真菌、病毒杀灭力弱1.含氯消毒剂2.过氧化物消毒剂3.醛类消毒剂4.环氧乙烷1.含碘消毒剂2.醇类消毒剂1.季铵盐类2.氯已定3.高锰酸钾医疗器械物品的消毒灭菌高危器械物品需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。中危器械物品不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。低危器械物品只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。快速周转的医疗器械室内空气消毒灭菌a.物理消毒法紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；滤过除菌：空气通过孔径小于0.2μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃b．化学消毒法包括化学消毒剂喷雾和熏蒸过氧乙酸喷雾、熏蒸；过氧化氢喷雾；二氧化氯溶液喷洒；中草药点燃烟熏手和皮肤的消毒用肥皂和流动水经常并正确洗手病原微生物污染时应用消毒剂消毒消毒灭菌的方法热力灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法辐射杀菌法滤过除菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法干热灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法高效消毒剂高效消毒剂中效消毒剂中效消毒剂低效消毒剂低效消毒剂3、实验室生物安全生物安全（biosafety）是生物技术安全的简称狭义的指现代生物技术的研究、开发、应用及转基因生物可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的危害。广义的指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。（1）生物安全的内容转基因生物、外来入侵物种、环境污染病原微生物...
