24/12/24文献汇报1电疗法电疗法Electro-TherapyElectro-Therapy•经皮神经电刺激经皮神经电刺激TranscutaneousElectricalNerveStimulation(TENS)•干扰电疗法干扰电疗法InterferentialCurrent(IFC)•直流电疗法直流电疗法GalvanicStimulation(GS)•微电流刺激微电流刺激Microcurrentstimulation(MCT)1818年关于电疗的漫画:《灵药—电万能药》24/12/24文献汇报2微电流刺激的优势微电流刺激的优势•1969年,Wolcott团队报告使用200-800微安电流加速伤口愈合,瘢痕组织抗张强度更好,抗菌能力更强。•安-舒二氏定律:弱刺激增强生理活动,强刺激抑制生理活动•微电流更接近生物体组织修复时的自发生物电流。指标TENSMCT电流强度毫安微安作用机理阻断神经传导促进损伤组织细胞的再生副作用高电流可能引起细胞电解1/3的病人有不适感刺激位置的皮肤轻微发红,10分钟后即可消失没有不适感人体感觉从轻微的麻刺感到肌肉抽动在感知阈值以下治疗后一旦停止,作用消失停止治疗后生物电继续变化24/12/24文献汇报3微电流刺激的作用微电流刺激的作用•增加ATP的产生•增加蛋白合成•增加离子交换•加快细胞运输•加快血流速度24/12/24文献汇报4文献汇报文献汇报•微电流刺激对视觉神经细胞存活与再生的作用–细胞实验—Retinalmüllercells–动物实验---RCS大鼠–人体实验•经角膜电刺激•经皮电刺激24/12/24文献汇报5人眼解剖结果人眼解剖结果24/12/24文献汇报6视网膜视网膜光24/12/24文献汇报7标题Directeffectofelectricalstimulationoninductionofbrain-derivedneurotrophicfactorfromculturedretinalmuellercells作者单位大阪大学医学院,日本发表期刊Investigatedophthalmologyandvisualscience,2008,IF=3.431目的研究电流刺激对脑源性神经营养因子的产生的作用相关性微电流刺激,视网膜,机理文献文献1124/12/24文献汇报8问题问题•电刺激对BDNF产生的作用机理是什么?24/12/24文献汇报9背景介绍背景介绍•Muller细胞:–视网膜中主要的胶质细胞–表达谷氨酸钠转运体->保护神经节细胞–合成谷氨酰胺合成酶–产生多种神经营养因子(BDNF,bFGF,IGF)•Ca2+:第二信使–L型电压依赖性钙通道->钙流入->神经营养因子–电刺激引起钙流入从而诱发多种基因表达24/12/24文献汇报10实验方法实验方法•Muller细胞培养>95%1代•电刺激:–AgCl针型电极(直径0.2mm)插入培养液间隔20mm–双相方波串(脉宽1ms;频率20Hz;电流10mA)–作用时间:30分钟•微阵列分析–RNA样本与包含31099个目标探针杂交•量化实时聚合酶链反应RT-PCRBDNF的mRNA水平•酶联免疫吸附法BDNF蛋白水平•L-VDCC阻滞的量化实时PCR(硝苯吡啶)24/12/24文献汇报11实验结果实验结果•微阵列分析–电刺激下,245个探针表达信号强度比对照组高两倍以上–神经系统发育相关基因中BDNF的基因表达增加2.6倍•BDNFmRNA上调–2h,3h增加1.2倍–6h降低24/12/24文献汇报12细胞内BDNF蛋白水平6h细胞外BDNF蛋白水平24/12/24文献汇报13L-VDCCL-VDCC阻滞阻滞0mA10mA0mA+blocker10mA+blocker24/12/24文献汇报14讨论讨论•钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道流入muller细胞上调BDNF的转录•Muller细胞不只合成BDNF,而且表达BDNF的特异受体•BDNF对光感受器和神经节细胞有神经保护作用•电刺激如何刺激L-VDCC的机制尚不明确24/12/24文献汇报15•学到的知识–细胞的培养–细胞实验–基因表达分析•不足–微阵列分析只选择了一种神经营养因子BDNF进行分析24/12/24文献汇报16问题问题•电刺激对BDNF产生的作用机理是什么?钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道流入细胞上调BDNF的转录24/12/24文献汇报17标题TranscornealelectricalstimulationpromotesthesurvivalofphotoreceptorsandpreservesretinalfunctioninRoyalCollegeofsurgeonsrats作者单位大阪大学医学院,日本发表期刊Investigatedophthalmologyandvisualscience,2007,IF=3.431目的研究电流刺激对视网膜光感受器细胞的作用相关性微电流刺激,视网膜,作用机理文献文献2224/12/24文献汇报18问题问题•本文采用的大鼠视网膜功能的评价方法是什么?24/12/24文献汇报19背景知识背景知识•RCS大鼠(RoyalCollege...