事实:烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,想一想如何来治疗该病人?取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植动物细胞培养第三节动物细胞工程及应用第三节动物细胞工程及应用动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体制备细胞核移植动物细胞工程技术动物细胞工程的基础1、概念是指从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。2、原理细胞增殖一、动物细胞培养幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织细胞培养胰蛋白酶处理单个细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。细胞贴壁生长培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖.细胞接触抑制细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。有关概念原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?2、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等独特之处有:1、液体培养基2、成分中有动物血清等不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体思考题:3、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?因为这些组织或器官,分裂能力旺盛,易于培养。成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖,分散做成细胞悬浮液有利于培养。5、培养瓶中的细胞会充满整个培养瓶吗?不会,细胞会贴壁分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。7、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)8、细胞膜的主要成份是什么?蛋白质和磷脂6、把细胞继续转移到其他培养瓶继续培养,怎样操作?将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。10、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?11、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?注意时间的控制不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近9、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?能1)无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖添加一定量的抗生素,定期更换培养液添加:糖(葡萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。4、动物细胞培养的条件2)营养3)适宜的温度和PH培养室中控制,使之达到36.57.2~7.4O2(95%空气)维持细胞的有氧呼吸5%CO2维持培养液的PH4)气体环境植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的细胞培养基特有成分植物激素葡萄糖、培养结果植物体培养目的快速繁殖培育无病毒植株获得全能性增殖蔗糖动物血清细胞株、细胞系细胞,某些蛋白质5、动物细胞培养技术的应用(1)培养健康皮肤细胞用于烧伤病人皮肤移植(2)基因工程的受体细胞,生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(4)用于检测有毒物质(3)细胞的生理、药理、病理研究资料一:培养的动物细胞可以用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后,培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数,可以判断某种物质的毒性。现在动物细胞培养已经成为检测有毒物质的快速而灵敏的有效手段。资料二:人工关节——软骨再生1.第一次手术:从病人关节软骨中未受力的部分,取出一片约为葡萄干大小...