第二十一章__免疫学方法技术VIP免费

第21章免疫学方法技术第一节第一节基于基于Ag-AbAg-Ab反应的检测方法反应的检测方法抗原抗原--抗体反应：指抗原与相应抗体在体内、外抗体反应：指抗原与相应抗体在体内、外发生高度特异性结合反应。由于实验所用的抗体发生高度特异性结合反应。由于实验所用的抗体存在于血清中，故又称血清学反应（存在于血清中，故又称血清学反应（serologicalserologicalreaction)reaction)用于：用于：抗原抗原（微生物、细胞、激素、细胞因子、（微生物、细胞、激素、细胞因子、肿瘤标志物等）、肿瘤标志物等）、抗体抗体的检测。的检测。特异性特异性抗原抗体反应的可抗原抗体反应的可见性见性适当的比例和浓度适当的比例和浓度可逆性可逆性抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点应用应用11、利用已知抗原检测未知抗体、利用已知抗原检测未知抗体（（11）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病：）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病：伤寒病、流行性乙型脑炎、伤寒病、流行性乙型脑炎、AIDSAIDS病等。病等。（（22）检测自身抗体—诊断自身免疫病：）检测自身抗体—诊断自身免疫病：SLESLE、类风湿、类风湿性关节炎等性关节炎等。。22、利用已知抗体检测未知抗原、利用已知抗体检测未知抗原（（11）鉴定病原菌：诊断疾病）鉴定病原菌：诊断疾病（（22）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌（（33）检测血型抗原、）检测血型抗原、HLAHLA抗原：鉴定血型，亲子鉴抗原：鉴定血型，亲子鉴定定（（44）检测药物半抗原：确认运动员是否服用兴奋剂）检测药物半抗原：确认运动员是否服用兴奋剂沉淀反应沉淀反应补体参与反应补体参与反应中和反应中和反应22334411免疫标记免疫标记凝集反应凝集反应22443355Ag-AbAg-Ab反应的基本类型反应的基本类型一、凝集反应（agglutinationreaction）概念：细菌、细胞等颗粒性抗原或包被有抗原的颗粒状物质（如聚苯乙烯乳胶等）与相应的抗体结合，出现肉眼可见的凝集团，称为凝集反应。1、直接凝集：将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。又分为玻片法和试管法。2、间接凝集：将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。细菌的鉴定和血型的检查检测病原体可溶性抗原，病原体感染后产生的抗体二、沉淀反应（precipitation）概念：可溶性抗原（免疫球蛋白、细胞裂解物、组织浸液等）与相应抗体结合，形成不溶性免疫复合物，出现不透明的沉淀物。在液体中进行出现絮状沉淀，在半固体琼脂凝胶上进行，形成白色的沉淀。1．单向免疫扩散(singleimmunodiffusion)2．双向免疫扩散(doubleimmunodiffusion)3．免疫电泳(immunoelectrophoresis)4．免疫比浊(immunonephelometry)11、单向免疫扩散（、单向免疫扩散（singleimmunodiffusiosingleimmunodiffusionn）：）：可溶性抗原在含相应抗体的琼脂凝胶中进可溶性抗原在含相应抗体的琼脂凝胶中进行的扩散，为一种半定量试验。行的扩散，为一种半定量试验。环的直环的直径与抗径与抗原含量原含量成正相成正相关关2、双向免疫扩散（douleimmunodiffusion）：抗原与抗体在琼脂板中相互扩散而形成一定类型的沉淀线的方法。常用于抗原或抗体的定性检测、组成和两种抗原相关性分析。33、免疫电泳（、免疫电泳（immunoelectrophoresisimmunoelectrophoresis））常用于血清蛋白种类分析，以观察常用于血清蛋白种类分析，以观察IgIg的异常增多或缺失。的异常增多或缺失。1）简易免疫电泳先将抗原样品在琼脂中进行电泳分离，可将蛋白质抗原分子分成不同的区带，然后将抗血清加入琼脂板横槽中，使二者进行双向扩散，当比例合适时即形成特异性的沉淀线，2）对流免疫电泳(counterimmunoelectrophoresis,CIEP)是将双向免疫扩散与电泳相结合的一种技术3）火箭免疫电泳(rocketimmunoelectrophoresis)，抗原在电场下通过含有一定量抗体的琼脂凝胶，并于抗体发生反应，形成沉淀带。可定量分析。4、免疫比浊在一定量抗体中分别加入递增量的抗原，经一定时间形成免疫复合物，液体混浊。用浊度计测量反应...