食品免疫学 7食品检测技术及其进展VIP免费

曹林南京农业大学食品科技学院免疫技术在食品分析、检验、检疫上的应用第七章GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.概述免疫检测技术案例分析免疫检测新技术和趋势食品免疫检测技术及其进展GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.食品行业——产业大•谷类、肉类、蔬菜、水果、饮料···•2007年，中国肉类生产增加值初步核算约为1万亿元，肉品加工销售收入2701亿元。食品行业总产值6万亿元，相当于4倍汽车产业!GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.食品安全的几个热点问题瘦肉精氯霉素苏丹红孔雀石绿GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.•生物危害–人畜共患病–食品源性致病菌–微生物食品质量安全危害存在于原料、加工过程、储运•化学危害–药残–激素–有害生成物–添加剂GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.第二节、免疫检测技术ELISA侧向流动试纸条GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.免疫检测技术1.酶联免疫吸附法（ELISA）ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗原或抗体，即"免疫吸附剂"（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为"结合物"（conjugate）；（3）酶反应的底物。最常见的检测方法是夹心法GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.免疫检测技术基本原理GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.免疫检测技术加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加样温育洗涤显色抗原抗体完成反应的保温过程，应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附的干扰物质。洗涤是最主要的关键技术。显色是酶催化无色的底物生成有色产物的温育反应。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.定量测定免疫检测技术ELSIA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线最高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数纸，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.根据转基因标准物质绘制的标准曲线根据外源蛋白标准绘制的标准曲线××××GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.96微孔板用于RR大豆和Bt玉米ELISA检测Agdia转基因产品内毒素蛋白检测试剂盒免疫检测技术GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.2.侧向流动型免疫试纸条方法（LateralFlowstrips）根据抗原抗体特异性结合的原理工作。硝化纤维代替聚苯乙烯反应板为固相载体。免疫检测技术GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.LateralFlowStripProtocolLateralFlowStripProtocol1.TestsforCryI(Ab)&CP4EPSPS2.Plant&seeds3.Morecomingsoon1231.Punchleafdisc2.Addbufferandgrindintube3.Insertflowstripsfortesting免疫检测技术GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.免疫检测技术GeneratedbyFoxitPDFCreator©Foxit...