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扩增活化的自体淋巴细胞技术VIP免费

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EAAL扩增活化的自体淋巴细胞治疗肿瘤技术简介IntroductionofEAALTherapy肿瘤免疫治疗的机制MechanismsofCancerImmunotherapy•通过调动机体自身的免疫系统,达到控制肿瘤生长,杀伤肿瘤细胞的目的。•前提:–肿瘤细胞有别于正常细胞•肿瘤抗原•肿瘤特异性T细胞免疫应答•肿瘤特异性抗体免疫应答•天然免疫对肿瘤细胞的杀伤作用如何达到有效的免疫治疗效果•有足够可以识别肿瘤抗原的杀伤性T细胞•机体的免疫环境有利于上述细胞发挥抗肿瘤功能–Th1/Th2–Treg•这些T细胞可以到达肿瘤组织局部–T细胞归巢•在肿瘤局部,这些T细胞可以发挥有效的杀伤功能–肿瘤基质及肿瘤组织微环境肿瘤疫苗过继细胞免疫治疗肿瘤的免疫治疗方法ApprochesofCancerImmunotherapy细胞免疫治疗CellularImmunotherapy•包括肿瘤在内的多种慢性病的最重要的生物治疗方法之一•肿瘤的细胞免疫治疗:–非特异性※LAK细胞※CIK细胞※EAAL细胞–特异性※Provenge,树突状细胞※肿瘤特异性T细胞-其它慢性病的细胞免疫治疗:※慢性病毒感染性疾病乙肝、丙肝艾滋病※慢性寄生虫感染※糖尿病※多发性硬化症※系统性红斑狼疮扩增活化的自体淋巴细胞(EAAL)的定义•自体免疫细胞治疗技术•CD3+T淋巴细胞为主(95.91%±0.24%),含少量NK细胞•体外扩增活化•肿瘤杀伤功能•改进的LAK和CIK治疗:细胞培养效率和肿瘤杀伤能力显著增强•EAAL是ExpandedActivatedAutologousLymphocytes(扩增活化的自体淋巴细胞)的简称。其定义是通过采取机体自身20-100ml静脉血,分离获得0.8-3x107外周血单个核细胞,经过体外无血清培养基培养,获得以CD3细胞为主的,包含CD8+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD3+CD56+NKT细胞、NK细胞,细胞数量在3x109以上的活化的混合淋巴细胞,这些细胞在体外具有明确肿瘤杀伤功能。EAAL技术特点使用无血清淋巴细胞培养基进行细胞培养,保证没有潜在的病源微生物感染不需使用单采机,对患者免疫系统没有破坏作用细胞扩增的高效性和高活性:扩增效率约为2001000倍独特的细胞培养工艺,少量外周血即可满足多次细胞回输的要求可与化疗联合,完全满足多个化疗疗程对细胞治疗次数和细胞治疗数目的要求,从而产生较好的协同治疗肿瘤效果。可进行多次、高频治疗,达到最好的治疗效果EAAL技术的临床-实验室操作流程16ManufacturingprocessofImmunecell-LC外周血20-100ml扩增及活化回输100ml/次,1-8次培养及扩增14-35天收集诱导的杀伤细胞EAAL的作用机制研究自体肿瘤细胞的体外杀伤效应(IFN-γ)培养后的淋巴细胞与顺铂以不同序贯方式联合对PLA-801D细胞的抑制率Groupinhibitedrates(%)QDDPEAALDDP+EAAL淋巴细胞作用前10h顺铂淋巴细胞作用前8h顺铂淋巴细胞作用前4h顺铂淋巴细胞作用同时顺铂淋巴细胞作用后4h顺铂淋巴细胞作用后8h顺铂淋巴细胞作用后10h顺铂46±1.741.7±3.035.8±1.327.1±2.418.5±1.316.7±2.214.0±0.916.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.488.1±0.64*88.9±0.16*96.7±1.99*55.8±0.33*73.6±0.67*66.2±0.12*53.2±0.14*1.6021.7322.0801.4242.2972.1691.885(注:联合作用组、单顺铂组和单淋巴细胞作用组抑制率进行单因素方差分析,P<0.01*)xEAL联合化疗的体外杀伤效果EAL细胞的肿瘤抗原特异性分析DonorA2-01A2-02A2-03CancerAntigenNY-ESO-1BC(%)0.170.860.32AC(%)1.122.572.3Multiple6.592.997.19MAGE-1BC(%)0.390.070.1AC(%)0.251.150.51Multiple0.6416.435.10MAGE-3BC(%)0.450.060.07AC(%)0.280.360.36Multiple0.626.005.14MAGE-10BC(%)0.520.150.23AC(%)0.250.220.48Multiple0.481.472.09P53BC(%)0.631.130.78AC(%)5.2712.248.7Multiple8.3710.8311.15HIVBC(%)0.590.20.22AC(%)0.240.250.31Multiple0.411.251.41FLUBC(%)1.060.60.66AC(%)4.4411.7610.01Multiple4.1919.6015.17EAAL在裸鼠体内对HepG2形成肿瘤的抑制作用裸鼠注射EAAL细胞的剂量分组组别注射渠道注射剂量(细胞数/只)注射液量(ml)每组裸鼠数量(个体号)每组肿瘤平均体积(mm3)每组肿瘤平均重量(g)G1阴性对照组微静脉00.310(1M01–1M10)1444.690.96G2低剂量组微静脉1.7×1050.310(2M11–2M2...

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