怎样鉴别异型淋巴细胞怎样鉴别异型淋巴细胞检验科:戴君洁主要内容物品准备标本处理涂片染色显微镜观察报告结果一、物品准备一、物品准备•准备干净的玻片、推片•瑞氏染液、•待检EDTA抗凝全血•计时器•显微镜•计数器二、样本处理二、样本处理•血涂片的制备:1、制作血涂片的载玻片要求清洁、干燥、中性、无油腻;2、距载玻片一端约1cm处滴EDTA抗凝全血30ul;3、将推片放置于血滴的前端,紧挨血滴,使其顺推片边缘散开;4、调整好推片与载玻片的夹角,使其约呈30度角,均匀向前推片
•影响涂片厚薄的因素有:血滴大小、推片与载玻片间的夹角,推片速度、血细胞比容
•制备涂片时,血滴越大、角度越大、推片速度越快,血膜越厚,反之越薄
血细胞比容增高、血液粘度较高时,应采用小血滴、小角度、慢推,可得满意结果;血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推
血涂片的好坏直接影响到细胞的鉴别
一张良好的血涂片,要求厚薄适宜、头体尾明显、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两端和两边留有一定空隙
三、涂片染色三、涂片染色1、滴入瑞氏染液I液数滴盖满标本,30秒;2、再加入瑞氏染液II液与I液比例为1:1,染1—3分钟;3、用流水冲洗涂片
注意事项:1、血涂片干透后火焰固定,否则细胞在染色过程中容易脱落
2、冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防燃料沉着在血涂片上
冲洗时间不能过久,以防脱色
如血涂片上有燃料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗
3、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液‘然后加染液
染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色
4、染色的深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH值密切相关,可根据情况适当纠正
四、显微镜观察四、显微镜观察•由于各种白细胞体积大小不等,在血涂片中分布很不均匀,一般体积较小的淋巴细胞在头、体部分布较多,而尾部和两侧以中性粒细胞核单核细胞较多