筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选VIP免费

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体1、概念动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程一、动物细胞融合一、动物细胞融合2、原理：膜的流动性一、动物细胞融合一、动物细胞融合33、结果：形成杂交细胞。、结果：形成杂交细胞。杂交细胞：杂交细胞：融合后融合后形成的具形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的有原来两个或多个细胞遗传信息的单核单核细胞。细胞。4、诱导方法：聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。5、过程：3、过程：细胞相互凝集膜上蛋白质分子和脂质分子重新排布细胞膜打开细胞发生融合病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集。6、优点：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能77、应用：、应用：用于研究细胞遗传、细胞用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培养等的免疫、肿瘤和生物新品种培养等的重要手段。重要手段。最重要的用途：制备单克最重要的用途：制备单克隆抗体隆抗体22、、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？33、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？方法有哪些？离心、振动、电激等物理方法；离心、振动、电激等物理方法；PEGPEG等化学方法等化学方法问题讨论动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。１、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，１、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能，只能得到杂交细胞不能，只能得到杂交细胞44、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导问题讨论５、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？相同，都是细胞膜的流动性问题讨论66、为什么要用、为什么要用灭活灭活的病毒？的病毒？病毒一般对生物体是有伤害的。病毒一般对生物体是有伤害的。仙台病毒仙台病毒物理或物理或化学方法化学方法丧失感染活性丧失感染活性保留融合活性保留融合活性主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞膜的流动性细胞膜的流动性用途诱导方法步骤融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目88、植物、动物细胞融合的比较、植物、动物细胞融合的比较1.1.抗体是由何种细胞产生的？抗体是由何种细胞产生的？2.2.抗体是如何产生的？抗体是如何产生的？？二、单克隆抗体二、单克隆抗体（一）获得抗体的传统方法1、方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，从动物血清中分离所需抗体。2、缺点：产量少、纯度低、特异性差产量少、纯度低、特异性差..3、解决问题的设想:免疫反应过程中，每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群，获得大量的单一抗体。4、面临的新问题：一个B淋巴细胞不可能在体外培养条件下无限增殖的。..1、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？问题讨论提示：1.1.什么样的细胞可以产生抗体？什么样的细胞可以产生抗体？2.2.什么样的细胞可以无限增殖？什么样的细胞可以无限增殖？2、瘤细胞和癌细胞有何区别？共同点：共同点：两者都有无限增殖的能力两者都有无限增殖的能力不同点：不同点：瘤细胞不能转移瘤细胞不能转移11、设计方案：、设计方案：一个一个BB淋巴细胞－－淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖能无限增殖杂种细胞杂种细胞（二）单克隆抗体的制备（二）单克隆抗体的制备2、单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体（选择性培养基）诱导其融合的方法有哪...