实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定1、熟悉水稻苗期稻瘟病的症状特征。2、学习水稻苗期稻瘟病的鉴定方法。一、目的一、目的实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定二、内容说明二、内容说明水稻稻瘟病（Pyriculariaoryzae）是水稻生产上的主要病害之一。它是一种真菌病害，分布范围及广，遍及世界及我国各个稻区，流行速度极快，对水稻的危害极大。根据稻瘟病发生的时期和部位，可分为苗瘟、叶瘟、节瘟、颈瘟和粒瘟。以叶瘟发生最早，在秧苗时期就可以发生，并可以进行鉴定。实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定虽然有些品种具有高度抗稻瘟病的特性，但是由于病源菌的生理小种变异频繁，抗病品种的抗性容易丧失，很快会变为感病型。这些并非是品种抗病性的改变，而是由于病源菌生理小种的频繁变化所致。必须不断了解病原菌的变化，并不断选育出新的抗病品种用于生产，才能有效地控制病害。实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定稻瘟病发生和流行的环境条件，温度以25-28℃最为适宜，空气相对湿度为96%以上最为适宜。这时菌丝发育和分生孢子形成均有利。分生孢子的萌发还要求有水滴存在。光照对孢子的形成、萌发、浸入都有抑制作用。分生孢子萌发后，浸入组织，经四天的潜育期就可出现病班，稻株易感病的生育时期是四叶期、分蘖期和穗期。偏施氮肥和排灌不良易导至稻瘟病的发生和流行。稻瘟病的鉴定方法分为人工接种鉴定和自然鉴定两种。前者常用于苗瘟和叶瘟的鉴定，后者可用于苗瘟、叶瘟、枝梗瘟和颈病等的鉴定。实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定三、所需用品和操作方法（一）所需用品1、材料：（1）抗感稻瘟病特性不同的水稻品种材料数个。（2）供试稻瘟病菌种。从当地收集分布广、致病力强的主要稻瘟菌代表性生理小种，将不同小种分别进行培养繁殖，接种时混合使用。实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定2、仪器和用品高压灭菌锅、超净工作台，酒精灯、恒温培养箱，三角瓶、培养皿、接种环、搪瓷盘、显微镜、载玻片、盖玻片、纱布、普通喷雾器或医用喷头喷雾器、注射器、橡胶管、保温保湿遮阳用品等。3、药品可溶性淀粉、酵母、琼脂、大麦或高梁种子、无菌水等。本实验将涉及到以下的器具:实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定（二）操作方法1、人工接种鉴定法（1）制备菌种－－采用酵母淀粉琼脂培养基将琼脂10-15g放入1000ml水中加热溶化，再加入可容性淀粉（或蔗糖）10g，酵母2g，分装入试管中，进行高压灭菌。取出后制成斜面，接入所采集的稻瘟菌菌种，放在26-28℃恒温箱中培养3-4天后，摇动三角瓶中的大麦粒，使菌丝均匀生长。待菌丝体长满大麦粒并变黑时，用自来水冲洗大麦粒上的菌丝，再将大麦粒薄摊于搪瓷盘中，用1-2层纱布覆盖以保湿，置于25-28℃下培养48小时，即可产生出大量孢子，可供接种之用。应注意在扩大繁殖时搪瓷盘内的湿度不宜保持过高，否则只长大量菌丝，而产孢子很少。实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定病原菌的一级培养繁殖实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定病原菌的二级培养繁殖实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定（2）育秧将各供试水稻材料的种子进行粒选，各取30-40粒种子，经消毒、冲洗、催芽后，在盛有肥沃泥土的搪瓷盘中育秧。每个盘中最好同时安排有感病和抗病品种作对照。在幼苗2叶期定株，每个材料选留10株生长一致的秧苗。定株后酌施2-3次氮肥，最后一次施氮肥应在接种前3-4天施用，使幼苗生长嫩绿。一般在3-4叶期接种。如采用注射接种鉴定法，可在秧田中育秧，移植于大田后进行接种鉴定。要注意以下几点：实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定适时播种既要考虑到在自然条件下的湿度和温度，最利于病菌的浸入，发病与流行，又要使供试材料正是最易感病的生育时期，一般在3－4叶期，日平均气温25－28℃和阴雨高湿，叶面长时间（12小时以上）常有水珠的时期，最有利于发病。育秧方式采用育秧盘育秧，每盘中最好都安排感病品种对照，整个鉴定材料中还应安排品种对照。采用注射接种方法，可以在秧田育秧，后移植于本田。苗床要增施氮肥（接种前4－5天），以利于发病。实验四、水稻苗期稻瘟病抗性鉴定（3）接种喷雾接种：当秧苗达3-4叶期时，先按病菌小种分别配制孢子悬浮液，用100倍显微镜检孢...
