乙肝病毒五项检测双抗体夹心法①乙型肝炎病毒表面抗原②乙型肝炎病毒表面抗体③乙型肝炎病毒e抗原④乙型肝炎病毒e抗体⑤乙型肝炎病毒核心抗体双抗体夹心法双抗原夹心法竞争抑制法竞争抑制法乙肝病毒五项检测乙型肝炎病毒表面抗原检验原理本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验原理
在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗体(HBsAb),配以酶标记抗体(HBsAb-HRP)及TMB显色剂等其他试剂,检测人血清或血浆中的乙肝表面抗原(HBsAg)
乙型肝炎病毒表面抗原样本要求本试剂使用样品为人血清或血浆,含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验
不能检测含叠氮钠、悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血的样品
样品中应无微生物,可在2~8℃储存一周,长期储存应低温冻存,避免反复冻融
使用前请将样品室温平衡30分钟以上,冷冻样品实验前需混匀
乙型肝炎病毒表面抗原检验方法配液:将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释
编号:将样品对应微孔板按序编号,每板应设阴性对照孔3孔,阳性对照孔2孔和空白对照孔1孔
(用双波长检测,可不设空白对照孔)
稀释:每孔加入样品稀释液20μL,空白对照孔除外
加样:分别在相对应孔中加入待测样品或阴性、阳性对照100μL,轻轻振荡混匀
(非常重要)温育:用封板膜封后,置37±1℃温育60±2分钟
(如有酶联反应加速仪温育时间可减半)
加酶:每孔加入酶标试剂50μL,空白孔除外,轻轻振荡混匀
温育:用封板膜封后,置37±1℃温育30±1分钟
(如有酶联反应加速仪温育时间可减半)
洗版:小心揭掉封板膜,用洗板机洗涤5遍,拿出来在扣在洗版纸上重重拍干
显色:每孔加入显色剂A、B液(底物)各50μL,轻轻振荡混匀,37±1℃避光显色30分钟
测定:每孔加入终止液50μL,轻轻振荡混匀,十分钟内测定结果
设定酶标仪波长于450nm处(建