乙肝病毒五项检测双抗体夹心法①乙型肝炎病毒表面抗原②乙型肝炎病毒表面抗体③乙型肝炎病毒e抗原④乙型肝炎病毒e抗体⑤乙型肝炎病毒核心抗体双抗体夹心法双抗原夹心法竞争抑制法竞争抑制法乙肝病毒五项检测乙型肝炎病毒表面抗原检验原理本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验原理。在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HBsAb-HRP）及TMB显色剂等其他试剂，检测人血清或血浆中的乙肝表面抗原（HBsAg）。乙型肝炎病毒表面抗原样本要求本试剂使用样品为人血清或血浆，含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。不能检测含叠氮钠、悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血的样品。样品中应无微生物，可在2~8℃储存一周，长期储存应低温冻存，避免反复冻融。使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。乙型肝炎病毒表面抗原检验方法配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照孔3孔，阳性对照孔2孔和空白对照孔1孔。（用双波长检测，可不设空白对照孔）。稀释：每孔加入样品稀释液20μL，空白对照孔除外。加样：分别在相对应孔中加入待测样品或阴性、阳性对照100μL，轻轻振荡混匀。（非常重要）温育：用封板膜封后，置37±1℃温育60±2分钟。（如有酶联反应加速仪温育时间可减半）。加酶：每孔加入酶标试剂50μL，空白孔除外，轻轻振荡混匀。温育：用封板膜封后，置37±1℃温育30±1分钟。（如有酶联反应加速仪温育时间可减半）。洗版：小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，拿出来在扣在洗版纸上重重拍干。显色：每孔加入显色剂A、B液（底物）各50μL，轻轻振荡混匀，37±1℃避光显色30分钟。测定：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，十分钟内测定结果。设定酶标仪波长于450nm处（建议用双波长450um/600~650nm），用空白孔凋零点后测定各孔A值。乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎病毒表面抗原注意事项本样品仅用于体外诊断，操作应按说明说严格进行。封板膜不能重复使用，不同批号、酶标试剂和阴性对照不可混用，不能与其它厂家试剂混用。避免在有挥发性物质及次氯酸类消毒液（如84消毒液）的环境下操作。使用前请将试剂平稳至室温（平衡30分钟以上），实验前将试剂轻轻振荡混匀，使用后立即回放2~8℃。未用完的微孔板条与干燥剂一起用自封袋密封2~8℃保存。过期试剂请勿使用。加液时必须用加样器，并经常校对加样器的准确性。加入不同样品或不同试剂组份时，应更换加样器的吸头和加样槽，以防止出现交叉污染。洗涤时各孔均匀需加满洗液，防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机应设定30~60秒浸泡时间。在洗版结束后，必须立即进行下一步，不可使用酶标板干燥。避免长时间的中断实验步骤，以确保每孔实验条件的均一。结果判定必须以酶标仪读数为准。读取结果时，应擦干酶标板底部，且孔内不能有气泡。不要触碰孔底部的外壁，指引或划痕可能影响板孔的读值。所有样品、废液和废弃物都应按照传染物处理。终止液为硫酸，使用时必须注意安全。显色时必须先加显色剂A液后再加显色剂B液，以免显色过低。由于ELISA反应原理的限制，本试剂检测阴性并不排除HBV（乙型肝炎）感染的可能。检测的阳性结果必须结合临床信息进行分析。乙型肝炎病毒表面抗体【检验原理】本试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附实验原理。在微孔条上预包被乙肝表面抗原（HBsAg），加入待测样品及酶标抗原（HBsAg-HRP）试剂进行温育。样品中的HBsAb与包被抗原和酶标抗原形成“包被抗原-抗体-酶标抗原”复合物。洗板后加入显色剂（TMB），复合物上连接的HRP催化显色剂反应，生成蓝色产物，终止反应后为黄色。若样品中乙无型肝炎表面抗体时，不显色。乙型肝炎病毒表面抗体【检验方法】配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20稀释。编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照2孔和空白对照1孔（用双波长检测，可不设空白对照孔）。加样：分别在相应孔中加入待测样品及阴、阳性对照各50ul。加霉：每孔加入酶标试剂50ul，...
