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弧菌和弯曲菌医学检验系临床微生物及免疫学教研室井申荣第一部分弧菌概述•弧菌科（Vibrionaseae）包括一群氧化酶阳性、具有端极鞭毛、动力阳性的细菌，有4个菌属，其中，弧菌属是一群氧化酶阳性，发酵葡萄糖，对弧菌抑制剂O/129（二氨基二异丙基喋啶）敏感的细菌。•弧菌属(Vibrio)广泛分布于自然界，尤以水中为多，有100多种。主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血弧菌（致病性嗜盐菌）。前者引起霍乱；后者引起食物中毒。霍乱弧菌霍乱弧菌（V.cholera）是人类霍乱的病原体，霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率甚高。属于国际检疫的烈性传染病。•霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（Classicalbiotype）和埃尔托生物型（EL-Torbio-type）。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来，全球共发生了七次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌，第七次病原是埃尔托型所致。1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。该菌株在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。一、生物学性状（一）形态染色•霍乱弧菌呈弧形或逗点形态，大小为1.4~2.6×0.5~0.8μm。革兰氏阴性菌，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。•取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。图注：霍乱弧菌的鞭毛（↑）和它可溶解的鞘膜（↑↑）负染，×3100图注：分裂中的霍乱弧菌冰冻蚀刻，×70000（二）培养特性•霍乱弧菌为需氧或兼性厌氧菌;•营养要求不高，耐碱不耐酸，在pH8.8～9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一pH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基;•在碱性平板上菌落直径为2mm，圆形，光滑，透明。•常用的选择培养基为硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS），霍乱弧菌在其中可形成较大的菌落，因发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色。（三）生化反应•两个生物型的霍乱弧菌都能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。•氧化酶、明胶酶试验均阳性。•能产生靛基质，霍乱红反应阳性ElTor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同•ElTor型V－P试验为阳性，能产生强烈的溶血素，溶解羊红细胞，在血平板上生长的菌落周围出现明显的透明溶血环，•古典型试验V－P试验为阴性，不溶解羊红细胞。•个别ELTor型霍乱弧菌株亦不溶血。霍乱弧菌的抗原结构特性O抗原H抗原属共同抗原＋群特异性＋－型特异性＋－耐热性（100℃2h）＋－（四）抗原性1．抗原结构：2．分群和分型：•根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个血清群。•根据是否与O1抗血清凝集分两大群，凡能与O1群抗血清发生凝集的称为O1群霍乱弧菌；凡不被O1群抗血清凝集的其它血清群统称为非O1群霍乱弧菌。O1群霍乱弧菌的血清分型型别别名O抗原成份原型稻叶型（Inaba）A、C异型小川型（Ogawa）A、B中间型彦岛型（Hikojima）A、B、C血清型：O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A、B、C三个抗原成份组成•生物型：O1群霍乱弧菌有古典生物型和E1Tor生物型之分，两个生物型具有相同的血清型。我国流行以ElTor、小川型霍乱弧菌为主。•噬菌体分型：对噬菌体的敏感性进行分型，其中较为实用的是第Ⅳ组和第Ⅴ组噬菌体。霍乱弧菌两个生物型的鉴别性状古典型E1Tor型溶血（1%绵羊红细胞）－d血凝（2.5%鸡红细胞）－＋V-P试验－＋多粘菌素B敏感试验（50U/片）＋－噬菌体Ⅳ组裂解（106/ml）＋－噬菌体Ⅴ组裂解（106/ml）－＋＋９０％以上为阳性；－９０％以上为阴性；ｄ１０－８９％阳性霍乱弧菌的变异性形态变异弧型→直杆状→多形菌落变异S←→R←→L溶血性变异（ElTor型）溶血性←→非溶血性传代毒力变异强毒株←→弱毒株←→无毒株血清型别变异小川型←→稻叶型（五）变异性：（六）抵抗力•霍乱弧菌古典生物...