第2节基因工程及其应用[学习目标]1.概述基因工程的基本原理及基本步骤。2.了解基因工程的应用及其安全性。知识点一基因工程的原理知识梳理1.概念:基因工程,又叫做□基因拼接技术或□DNA重组技术。通俗地说,就是按照□人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以□修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,□定向地改造生物的遗传性状。2.原理:□基因重组。3.操作水平:□DNA分子水平;操作环境:体外。4.基本工具(1)基因的“剪刀”——□限制性核酸内切酶(简称限制酶)。①特点:一种限制酶只能识别一种□特定的核苷酸序列,并在□特定的切点上切割DNA分子。②作用位点:□磷酸二酯键。③实例:大肠杆菌的一种限制酶能专一识别GAATTC序列,并在G和A之间切割,产生两个带有黏性末端的DNA片段,如图所示:(2)基因的“针线”——□DNA连接酶。①作用对象:两个具有□相同末端的DNA分子。②作用位置:DNA骨架上□脱氧核糖与□磷酸之间的缺口。③产物:形成重组DNA分子。(3)基因的运载体①作用:将外源基因送入□受体细胞。5.操作步骤1.运载体和细胞膜上的载体相同吗?提示:不同。运载体是将外源基因导入受体细胞的专门运输工具,常用的运载体有质粒、动植物病毒、噬菌体等;载体是位于细胞膜上的载体蛋白,与控制物质进出细胞有关。2.限制酶与DNA连接酶作用的化学键相同吗?提示:相同,均作用于磷酸二酯键。3.切割目的基因和运载体为什么常用同一种限制酶?提示:因为用同一种限制酶可以切割出相同的黏性末端,有利于目的基因与运载体结合。4.与诱变育种、杂交育种相比,基因工程育种的优点又是什么?提示:目的性强,定向改造生物的性状;克服远缘杂交不亲和障碍。5.基因工程中,为什么目的基因在不同物种中均能成功表达?提示:不同的生物体共用一套遗传密码。典题精析[例1]如图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是()A.DNA连接酶、限制酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶C.解旋酶、限制酶、DNA连接酶D.限制酶、DNA连接酶、解旋酶解题分析①处为氢键,解旋酶可断开氢键,使DNA分子解旋;②处为磷酸和脱氧核糖形成的化学键,限制酶可断开此化学键,常用于基因工程中切割运载体和目的基因;③处为断开的DNA片段的切口,可将此连接起来的酶是DNA连接酶。答案C[例2]如图表示一项重要的生物技术,对图中物质a、b、c、d的描述(a、b、c为三种工具),正确的是()A.a具有多个标记基因和多个限制酶切点,最为常用的是噬菌体B.要获得相同的黏性末端,通常用同种b去切割a和dC.c连接双链间的氢键,使黏性末端处碱基互补配对D.重组DNA导入受体细胞中即可表达解题分析在基因工程中,最常用的运载体是质粒,其上有标记基因和限制酶切点,A错误;通常使用同种限制酶切割目的基因和运载体,以获得相同的黏性末端,B正确;c为DNA连接酶,其作用是使两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,C错误;重组DNA导入受体细胞后,有可能表达,也可能不表达,需要检测和鉴定,D错误。答案B题后归纳1.DNA相关六种酶的比较2.提醒目的基因与运载体结合的过程中,形成的重组分子中不只有目的基因和运载体的结合物,还有目的基因之间或运载体之间的结合物。知识点二基因工程的应用及其安全性知识梳理1.基因工程的应用(1)作物育种①现状:近几年来,人们利用基因工程的方法,获得了□高产、□稳产和具有□优良品质的农作物,培育出具有各种□抗逆性的作物新品种。②实例:a.抗棉铃虫的转基因抗虫棉、烟草、玉米等。抗虫基因来自□苏云金芽孢杆菌,该基因能够指导合成一种□毒性很强的蛋白质晶体,使棉铃虫等害虫死亡。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物,使作物自身具有□抵御虫害的能力。b.转基因奶牛、超级绵羊等。③意义:抗虫基因作物的使用,不仅□减少了农药的用量,大大□降低了生产成本,而且还减少了农药对环境的污染。(2)药物研制①现状:在药品生产中,有些药品由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。用基因工程的方法能够高效率地生产出各种□高质量、□低成本的药品,如胰岛素、□干扰素、□乙肝疫苗。②实例:胰岛素科学家将人体内能够产...