肠道细菌实验VIP专享VIP免费

第四次实验课内容第四次实验课内容11、细菌代谢产物检查（示教）、细菌代谢产物检查（示教）22、肠道杆菌在选择鉴别培养基的生长情况、肠道杆菌在选择鉴别培养基的生长情况（示教）（示教）SSSS平板、双糖铁培养基平板、双糖铁培养基33、肥达试验（结果示教）、肥达试验（结果示教）实验一细菌代谢产物检查实验一细菌代谢产物检查细菌具有不同的代谢酶系统，因此对营细菌具有不同的代谢酶系统，因此对营养物质的利用与分解能力也各不相同，可养物质的利用与分解能力也各不相同，可形成不同的中间代谢产物与终末代谢产物。形成不同的中间代谢产物与终末代谢产物。根据细菌的代谢能力及其产物不同鉴别细根据细菌的代谢能力及其产物不同鉴别细菌，称为细菌的生化反应。本实验通过介菌，称为细菌的生化反应。本实验通过介绍常用生化反应的经典试验方法，以了解绍常用生化反应的经典试验方法，以了解细菌生化反应的机制与实验原理。细菌生化反应的机制与实验原理。原理：原理：染色镜检普通琼脂平板中菌落的形态不能鉴别能够鉴别实验一细菌代谢产物检查实验一细菌代谢产物检查细菌代谢产物分解代谢产物合成代谢产物生化反应?细菌菌落的色素观察细菌菌落的色素观察金黄色葡萄球菌：产生金黄色葡萄球菌：产生只局限于菌落只局限于菌落的的脂溶性脂溶性金黄色色素金黄色色素。。铜绿假单胞菌：产生带荧光的铜绿假单胞菌：产生带荧光的水溶性水溶性色素，该色素可扩散至色素，该色素可扩散至菌落周围，使培养基呈亮绿色。菌落周围，使培养基呈亮绿色。金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌细菌菌落的溶血现象观察细菌菌落的溶血现象观察乙型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌::透明的无色溶血环。透明的无色溶血环。一、糖发酵试验一、糖发酵试验1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。基本原理基本原理糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；痢疾杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；乙型副伤寒杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。基本原理基本原理酸的产生酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫养基时预先加入溴甲酚紫[Ph5.2[Ph5.2（黄（黄色）色）-6.8-6.8（紫色）（紫色）]]，当发酵产酸时，可，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。使培养基由紫色变为黄色。气体的产生气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。管中有无气泡来证明。糖发酵试验：乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖发酵试验：细菌葡萄糖丙酮酸各种酸类甲酸H2+CO2脱氢酶四、操作步骤四、操作步骤11、编号、编号用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。称和所接种的菌名。22、接种、接种取盛有葡萄糖发酵培养基的试管取盛有葡萄糖发酵培养基的试管33支，分别接支，分别接种大肠杆菌、痢疾杆菌、乙型副伤寒杆菌。另取种大肠杆菌、痢疾杆菌、乙型副伤寒杆菌。另取乳糖发酵培养基试管乳糖发酵培养基试管33支，分别接种这三种细菌。支，分别接种这三种细菌。33．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置管置37℃37℃温室中培养温室中培养2424小时。小时。图1糖类发酵试验观察结果观察结果::观察结果时，看各管颜色变化及观察结果时，看各管颜色变化及杜氏小管有无气泡。杜氏小管有无气泡。产酸产气用“⊕”表示；产酸产气用“⊕”表示；只产酸不产气用“只产酸不产气用“+”+”表示；表示；不产酸也不产气用“不产酸也不产气用“—”—”表示。表示。二、靛基质（吲哚）产生试验二、靛基质（吲哚）产生试验(I)(I)原理：原理：分解蛋白胨内的色氨酸形成靛基质（无色）分解蛋白...