hBDNF-GFP基因转染神经干细胞对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响VIP免费

生堡急盗匡堂盘查至塑生!旦筮!§鲞筮墨塑鱼幽』她丛型：△螋塾至堂：巡：!墨：№：墨hBDNF—GFP基因转染神经干细胞对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响刘勇陈二涛冯东福潘栋超汪洋【摘要】目的探讨移植hBDNF-GFP基冈转染神经干细胞后对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响。方法①78只sD大鼠随机分为正常对照组(I／,=6)、视神经夹伤组(n=72)。视神经夹伤组动物行右侧视神经夹伤后随机平均分为三个亚组：分别于玻璃体腔内注射0．01mol／LPBS(PBS组)，GFP基闲转染神经干细胞(GFP-NSCs组)和hBDNFoGFP基因转染神经干细胞(hBDNF-GFP-NSCs组)。各组动物单纯暴露左侧视神经作为假损伤组。分别于移植后3d，7d，14d和28d处死动物取视网膜，ELISA法检测各组视网膜中BDNF含量。②另取6只视神经损伤大鼠移植hBDNF-GFP-NSCs，分别于2周、4周和8周各处死2只大鼠，取眼球做冰冻切片观察移植细胞存活、迁移情况。③35只sD大鼠随机分为4组：正常对照组(凡=5)、右眼视神经损伤NSCs治疗组(／／,=10)、GFP-NSCs治疗组(凡=lO)及hBDNF-GFP-NSCs治疗组(n=10)。④各组于术后4周和8周分别处死5只大鼠，West．era-blot法检测视网膜组织中BDNF表达。结果①ELISA结果显示，正常对照组BDNF含量与假损伤组间比较差异无统计学意义(P>0．05)，移植手术后第3天时，三个损伤哑组视网膜匀浆上清中hBDNF含避明最增加(与假损伤组比较P<0．05)，而i组间差异无统计学意义(P>0．05)；7d时，GFP-NSCs组与假损伤组比较差异具有统计学意义(P<0．05)，而PBS组、hBDNF-GFP-NSCs组与假损伤组比较差异尤统计学意义(P>0．05)，PBS组与GFP-NSCs组I’日J及hBDNF-GFP-NSCs组与GFP-NSCs组问差异具有统计学意义(P<0．05)；移植第14天和28天时，PBS组和GFP-NSCs组中视网膜BDNF含量降低，而hBDNF-GFP-NSCs组中BDNF含量与其他三组比较明显升高，差异有统计学意义(P<0．05)。②冰冻切片示移植后，hBDNF-GFP-NSCs可在宿主视网膜内存活，并逐渐迁移至视网膜各层。③Western．blot检测显示，各组内第4周和第8周BDNF表达差异无统计学意义，移植hBDNF-GFP-NSCs组视网膜组织中BDNF表达明显高于于其他各组。结论hBDNF-GFP基因转染神经干细胞移植后可在宿主视网膜长期存活，且町以稳定高表达BDNF。【关键词】脑源性神经营养因子；干细胞；转染；视网膜EffectsofhBDNF-GFPgene-transl；eetedmmralstemcelltransplantation帆BDNFexpressionintherl—矗laofratsfollowingopticllervecrushinjuryHUYong，CHENEr-tao。FENGDong-fu，PANDong-chao，WANGYang．Oel,om,,删ofNeurosurgery，TheThirdPeople’sHospitalandInstituteofTraumaticMedicine，SchoolofMedicine，鼢喇JiaotongUniversity，Sh舭gh,a201900，ChinaCorrespondingauthor：FEMGDong-fu，Emaihfeng—elf@yahoo．coin【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofhumanRrain-derivedneurotrophicfactor-gammafetopro-tein(1aBDNF-GFP)gene-tranffectedneuralstemcell(NSC)transplantationOHBDNFexpressionsintheretinaofmrsafteropticnerve(ON)crushinjury．Method①Seventy-eightSprague-Dawley(SD)Tatswererandomlyas—signedintoacontrolgroup(，l=6)andONcrushgroup(／／,=72)．IntheONcrushgroup，thefightONwascnrshedwhiletheleftNOwasexpo,H!asshaminjmy．RatsintheONcrushgroupweredividedinlothreesub-groups：PBSgroup(intravitreousinjectionof0．01mol／Lphosphatebufferedsolution)；GFPgroup(intravitreoustransplantationofGFPgene-仃摊l舒ectedNSCs)；andhBDNF-GFPgroup(inWavitreoustransplantationofhBDNF-·841··基础研究·DOI：10．3760／cma．j．issn．1671-0282．2009．08．016基金项目：卜海巾．教委自然科学基会重点项日(04BB23。07z泓2)作者单位：201900卜海，卜海交通大学医学院附属第二人民医院神经外科，上海交通大学医学院创伤医学研究所(刘勇、陈二涛、冯东福、潘栋超)；复H．人学上海医学院解剖与组织胚胎学系(征洋)通信作者：冯东福，Email：feng—df@yahoo．咖万方数据·842·主堡鱼途医堂盘查2塑堡!旦箜!墨鲞箜§甥堡丛翌』蛾M型：△螋堕至螋：型!!...