文章编号:!""#$%&&!(’""’)"%$""!%$"%大豆卵磷脂的微量提纯!彭一鸣,蒋笃孝(暨南大学化学系,广东广州(!")’*)摘要:对市售级大豆卵磷脂提纯,采用制备型薄层色谱法(+,-.)进行纯化,得到纯度较高的卵磷脂,能作为薄层扫描实验中的标准品。将获得的纯品经化学和红外分析,证实其成分。关键词:制备型薄层色谱;卵磷脂中图分类号:,/’"!0’文献标识码:1卵磷脂是一种天然的两性表面活性剂,化学名称为磷脂酰胆碱(+234526789:;.23;8<=,简称+.)。!&%%年,法国化学家>3?;:首先从鸡蛋中分离得到[!]。卵磷脂广泛存在于动植物体内,具有重要的生理功能和独特的乳化性能[’]。它首先是一种重要而安全的食品乳化剂,此外还是一种保健食品。其在临床上用于动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱及营养不良的治疗。@6=<23;A9等人[)]的研究表明,卵磷脂在延缓衰老、治疗心血管系统病方面具有积极的意义,并且在饲料加工、石油、皮革、涂料、表面涂层和橡胶生产,以及在化妆品中有其独特的功效。我国已将开发高纯卵磷脂产品的工作定为’"!"年发展规划的重要任务[%]。目前作为标样的卵磷脂主要是美国/B>C1公司的产品,以及西德、意大利等少数几个国家。进口产品一般采用高效液相法[(]提纯产品,价格昂贵,不适用于大多数试验室经常使用。而国内一般采用的柱层析法,其提纯周期长,耗用的试剂量大,原料浪费明显,对于国内许多实验室仍不适用。本论文采用市售级大豆卵磷脂为原料,采用+,-.法(制备型薄层色谱法)进行卵磷脂的纯化研究。并通过色谱方法和波谱学方法进行结构表征。!实验部分!0!主要仪器与试剂!0!0!试剂氯仿、甲醇、无水乙醇、三乙胺、氢氧化钠、溴百里酚蓝、羧甲基纤维素钠(.C.)均为分析纯,硅胶>D’(%和硅胶高效板为青岛海洋化工集团产品,卵磷脂纯品为美国/B>C1公司产品,其纯度为,-.##E,大豆卵磷脂(进口分装),自制去离子水。!0!0’显色剂称取"0"%F溴百里酚蓝固体,加入到新鲜配制的!""G;的"0"!G3;H-I6JK溶液中,搅拌均匀,备用。!0!0)主要仪器红外光谱仪LMNBIJO((,德国@PNQLP;超声波清洗仪QM(’"",RD—.型紫外分析仪,电子分析天平D1’!"%!0"实验方法!0’0!制备型薄层色谱硅胶板称取)"F硅胶,加入质量分数为(E.C.调匀成浆状,经超声波清洗仪超声去气泡,涂布于’"SGT’"SG的玻璃板上,厚度大约为!U’GG,自然晾干。使用前先用甲醇除杂,再置于!"(V烘箱中活化)"G8<,置于干燥器中备用。!0’0’卵磷脂的提纯!,-.预试验:将市售级大豆卵磷脂和48FG6公司卵磷脂标样溶于氯仿W甲醇(#W!)的溶液中,在同一块高效硅胶板上平行点样,以氯仿W无水乙醇W三乙胺W水(!"W!!0)W!!0XW’0X)为展开剂,展开#G8<,待层析完毕后,取出薄板,自然晾干。放入溴百里酚蓝染液缸中,染色!(4。取出后用滤纸吸干残留的染液,用!"(V烘箱使之干燥。在天蓝色背景下可见一系列绿色圆形斑点,与原点距离最近的绿色圆形斑点与/B>C1公司卵磷脂标样具有相同的PY值约为"0!&左右,即为卵磷脂。如图!所示。"提纯:称取市售级大豆卵磷脂"0"&’!F,用氯仿W甲%!武汉工业学院学报Z3[\<6;3Y][26<+3;:7=S2<8SN<8^=\487:’""’年!收稿日期:’""’$"&$’"基金项目:国务院侨办重点学科基金项目(#)1!!#)作者简介:彭一鸣(!#XX$),男,湖南省邵阳市人,在读硕士研究生。万方数据醇(!"#)的溶液充分溶解,用毛细管在制备型薄层色谱硅胶板距下端$%&处密集点样,以氯仿"无水乙醇"三乙胺"水(#’"##()"##(*"$(*)为展开剂,展开#+%&。层析完毕,取出薄板,自然晾干。紫外灯下刮取距原点最近的一条光带。用氯仿浸泡刮取的硅胶带,超声波清洗仪振荡+&,-,反复+次,合并上层清液,真空干燥得产品。#(市售级大豆卵磷脂;$(.,/&0公司卵磷脂标准品图#不同纯度卵磷脂123图!纯度的鉴定!("以氯仿#甲醇#水$!%#""为展开剂[4],与56789公司卵磷脂标准品在同一块高效硅胶板上平行展开!%&,层析完毕后,取出薄板,干燥后放入碘缸。薄板出现黄色圆形斑点,与标准品具有相同的!"值,从而表明制备的产品为卵磷脂纯品。如图$所示。#(制备的卵磷脂纯品;$(.,/&0公司卵磷脂标准品图$两种卵磷脂的薄层层析对比图!(!将提...