基金项目:国家自然科学基金项目(30371335)作者单位:710061西安交通大学第一医院内分泌研究所促甲状腺素受体抗体检测的临床意义兰玲综述施秉银审校【摘要】促甲状腺素受体抗体(TRAb)与多种自身免疫性甲状腺疾病的发病密切相关,是临床诊断这些疾病的重要指标。TRAb在功能上可分为甲状腺刺激性抗体(TSAb)和甲状腺刺激阻断性抗体(TSBAb),可与促甲状腺素受体分子上不同位点结合产生不同生物学效应。其中TSAb可引起Graves病(GD)患者甲状腺功能亢进和弥漫性甲状腺肿的发生,而TSBAb则可导致自身免疫性甲状腺功能减退症(甲减)患者甲减的发生。本文将对TRAb检测在GD鉴别诊断、辅助制定GD治疗方案、抗甲状腺药物疗效及预测复发、筛查自身免疫性甲减等方面的临床价值作一全面综述。【关键词】促甲状腺素受体抗体;甲状腺刺激性抗体;促甲状腺素结合抑制免疫球蛋白;Graves病;Graves眼病促甲状腺素受体抗体(TRAb)是针对促甲状腺素受体(TSHR)的自身抗体,与Graves病(GD)和自身免疫性甲状腺功能减退症(甲减)的发病密切相关。TRAb主要包括甲状腺刺激性抗体(TSAb)和甲状腺刺激阻断性抗体(TSBAb),可与TSHR分子上不同位点作用产生不同生物学效应。本文将对TSHR和TRAb研究的最新进展及TRAb检测的重要临床价值作一综述。1TSHR和TRAb概况1.1人TSHR(hTSHR)分子结构TSHR是位于甲状腺滤泡上皮细胞膜上的一种大分子糖蛋白,属G蛋白偶联受体超家族,是GD的主要抗原。编码hT2SHR的基因位于14q31,长60kb,含有10个外显子、9个内含子,编码764个氨基酸。TSHR蛋白分子量为85ku,加糖链后实际分子量为100ku[1],分胞外、跨膜和胞内区3部分。胞外区是TSH及TRAb识别和结合的部位,由第1～9个外显子编码;而7个跨膜片段及胞内区则与G蛋白偶联产生效应,由第10个外显子编码。1.2TSHR与TSH或TRAb结合后的信号转导hTSHR的胞外区为TSH和TRAb识别及结合部位,有多个不连续的TSH结合位点。TSAb及TSBAb的表位分别以胞外区的N端和C端为主。大部分GD患者在胞外N端存在一个或多个TSAb表位,而甲减和特发性粘液性水肿患者TSBAb表位主要位于C端。TSHR跨膜区和胞内区与G蛋白偶联,具有信息传递、维持自身三维结构等生物活性。TSH是甲状腺细胞最主要的调节因子,生理情况下与受体结合后经G蛋白激活两个信号系统以实现其效应[1]:(1)腺苷环化系统:激活的腺苷环化酶使细胞内cAMP升高,从而调节细胞生长、分化及碘的摄取、激素合成和甲状腺球蛋白(Tg)、甲状腺过氧化物酶(TPO)和钠碘转运体(NIS)的转录。(2)磷脂酶C(PLC)和蛋白激酶A系统:通过细胞内钙离子浓度和PLC活性的变化等调节碘外流、Tg碘化和H2O2产生等。前者占主导地位,但二者互相联系、互相影响,共同调节甲状腺细胞功能。而TRAb则可模拟TSH与TSHR结合,激活或阻断细胞内腺苷环化系统,通过影响第二信使cAMP的产生而引发自身免疫性甲状腺疾病的异常甲状腺功能(甲功)状态。1.3TRAb异质性二十世纪末,在TSHR2促黄体生成素(LH)/绒毛膜促性腺激素受体(CGR)嵌和体的研究中有人发现,TSAb也是一种异质性抗体,即在TSHR分子上的识别位点有所不同,胞外N端的表位称同质性表位,N端以外的表位称异质性表位。2TRAb的临床检测目前已建立了两种较为成熟的TRAb检测技术[2],即根据TRAb可竞争抑制125I2促甲状腺素(TSH)与受体结合的原理设计的放射性受体分析法(RRA)和根据TRAb可模拟或阻断TSH作用影响体外特定细胞系第二信使cAMP产生的原理设计的生物分析法,前者检测的TRAb又称TSH结合抑制免疫球蛋白(TBII),它检测所有与TSH竞争结合位点的TRAb,故只能检测TSAb、TSBAb总和,而不能将二者区分开。目前,称为第二代产品的TBII诊断药盒使用人的重组TSH受体(由K562白血病细胞高密度表达)和鼠单克隆抗体,并且使用自身抗体或TSH包被聚乙烯试管,灵敏度和特异性已有很大提高[3],TBII阳性率从第一代使用猪抗原的18.8%提高到使用人·24·国外医学内分泌学分册2005年1月第25卷第1期SectionEndocrinolForeignMedSci,January2005,Vol25,No.1©1995-2006TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.抗原的81.3%[4]。另外,采用简便、精确、经济的表达TSHR的中国仓鼠卵细胞(CHO)的新型生物检测方法也已应用于TRAb临床检测,使TRAb在多种...
