檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸外结核产生强大的抗体反应,通过血清免疫学手段可应用于临床肺外结核的诊断[6]
PPE17蛋白这种强大免疫活性使其不仅可应用于临床的早期诊断,还有可能开发新型抗结核药物的潜在靶点
为了评价利用重组PPE17蛋白作为临床诊断抗原的可能性,我们利用基因克隆技术将PPE17核酸序列克隆至载体pET-24b
实验结果发现,PPE17蛋白获得高表达,表达量达到30%,但以包涵体的形式存在
经过复性和亲和纯化后获得较高纯度的PPE17蛋白,WesternBlot结果证实该蛋白具有较强的抗原性
对于结核病人血清学诊断而言,单一抗原作为诊断抗原时,阳性检出率往往都比较低
PPE蛋白家族抗原间存在一定程度的互补性,后期实验我们将通过生物信息学分析将这些互补抗原进行串联融合表达来提高检出率
本实验成功的在原核系统内获得了PPE17蛋白高效表达,获得的重组蛋白有可能开发成结核病感染的早期快速诊断试剂,以控制结核病的传播和流行
参考文献[1]AhmedN,CaviedesL,AlamM,etal.DistinctivenessofMycobac-teriumtuberculosisGenotypesfromHumanImmunodeficiencyVirusType1SeropositiveandSeronegativePatientsinLima[J].PeruJClinMicrobiol,2003,41(4):1712-1716.[2]BelloAK,NjokuCH.Tuberculosis:currenttrendsinDiagnosis[J].NigerJClinPract,2005,8(2):118-124.[3]AbdallahAM,VerboomT,HannesF,etal.Aspecialsec