α-α-淀粉酶产生菌株（细菌）的淀粉酶产生菌株（细菌）的分离纯化及检测分离纯化及检测目的要求目的要求了解利用选择培养基进行了解利用选择培养基进行α-α-淀粉酶产生淀粉酶产生菌株分离的要求菌株分离的要求。。掌握掌握α-α-淀粉酶产生菌株淀粉酶产生菌株相关分离纯化的相关分离纯化的方法步骤——稀释平板菌落分离、挑菌保方法步骤——稀释平板菌落分离、挑菌保存、平板点植、观察测定透明圈等。存、平板点植、观察测定透明圈等。学习在平板上进行学习在平板上进行α-α-淀粉酶产生菌株的淀粉酶产生菌株的检测及产酶高低的判断。检测及产酶高低的判断。平板分离用选择培养基平板分离用选择培养基可溶性淀粉可溶性淀粉10g10g；；1%1%豆粕粉浸出液豆粕粉浸出液1000mL1000mL；；NaNa22HPOHPO44.12H.12H22O2gO2g；；（（NHNH44））22SOSO441g1g；；CaClCaCl220.5g0.5g；；KCl0.15gKCl0.15g；；琼脂琼脂20g20gpH7.0~7.6pH7.0~7.6121.3℃121.3℃灭菌灭菌2020分钟分钟1%1%豆粕粉浸出液的制备豆粕粉浸出液的制备称取称取1%1%豆粕粉，加入适量水；豆粕粉，加入适量水；加热煮沸加热煮沸20min20min，过滤后定溶至，过滤后定溶至1%1%的体的体积备用；积备用；加热过程注意补水。加热过程注意补水。实验中器材的准备（需要包扎灭菌）实验中器材的准备（需要包扎灭菌）1ml1ml无菌吸管无菌吸管66支支99ml99ml无菌水无菌水11瓶（带玻珠，装于瓶（带玻珠，装于250250mlml三角瓶中）三角瓶中）9ml9ml无菌水无菌水44支（装于支（装于18×180mm18×180mm试管）试管）不锈钢涂布器不锈钢涂布器33支支实验步骤及安排实验步骤及安排今天完成稀释平板分离培养——倒平板、今天完成稀释平板分离培养——倒平板、样品稀释、加样、涂布、恒温倒置培养（样品稀释、加样、涂布、恒温倒置培养（337℃48hr7℃48hr）；）；22天后晚上，挑菌保存，点植平板培养天后晚上，挑菌保存，点植平板培养2424hrhr；；点植后点植后24hr24hr内检测内检测淀粉酶产生量——测量淀粉酶产生量——测量平板上透明圈、菌落直径，并计算出比值。平板上透明圈、菌落直径，并计算出比值。实验结果实验结果记录稀释平板分离的结果——细菌数、产记录稀释平板分离的结果——细菌数、产淀粉的菌数及所点比例；淀粉的菌数及所点比例；记录点植结果——挑取菌株编号、透明圈记录点植结果——挑取菌株编号、透明圈直径、菌落直径，并计算出透明圈、菌落直径、菌落直径，并计算出透明圈、菌落直径比；直径比；根据以上结果完成实验报告；根据以上结果完成实验报告；确定相关菌株（确定相关菌株（5~105~10株）保存好，准备株）保存好，准备进行下周摇瓶初筛试验。进行下周摇瓶初筛试验。
