第22卷第3期2003年5月无锡轻工大学学报JournalofWuxiUniversityofLightIndustryVol.22No.3May2003文章编号:1009-038X(2003)03-0046-07收稿日期:2002-12-11;修回日期:2003-01-19.作者简介:朱华(1977-),男,浙江绍兴人,发酵工程硕士研究生.HPLC法测定红曲中酸型与内酯型MonacolinK朱华,许赣荣,陈蕴(江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214036)摘要:功能性红曲产品中的MonacolinK包括酸型和内酯型两种成分.采用HPLC法,色谱柱为ZORBAXSBC218,5μm,250mm×4.6mm,柱温28℃,V(乙腈)∶V(0.1g/dL磷酸水溶液)=65∶35为流动相,紫外检测器波长为238nm,可同时对酸型和内酯型的MonacolinK进行定量检测,线性关系和重复性均满足要求.固体红曲样品可以用甲醇直接萃取,液态的红曲样品在甲醇萃取之前需调整pH值6～7,测定结果能反映原样品中两种形态MonacolinK的含量.色素对MonacolinK检测存在一定影响,但对于多数功能性红曲色价低、MonacolinK高的特点,这一影响作用较轻,可以忽略.关键词:红曲霉;功能红曲;莫纳可林K;HPLC法中图分类号:657.7文献标识码:AHPLCAnalysisofAcidFormandLactoneFormMonacolinKfromMonascusRedRiceZHUHua,XUGan2rong,CHENYun(KeylaboratoryofIndustrialBiotechnology,MinistryofEducation,SouthernYangtzeUniversity,Wuxi214036,China)Abstract:High2performanceliquidchromatography,usingaZORBAXSBC218column(5μm,250mm×4.6mm)andacetonitrile20.1g/dLphosphatesolution(63∶35)asmobilephasewithdetectionat238nmwasusedtoanalyzetheMonacolinKinfunctionalredrice(orredyeastrice).Undersuchchromatographiccondition,thetwoformsofMonacolinK(acidformandlactoneformofMonacolinK)canbedeterminedsimultaneously.Themethoddemonstratedgoodlinearrelationshipandrepeatability.SolidMonascusproductsamplescouldbemeasuredafterdirectlyextractedbymethanol,whileliquidMonascusfermentationbrothwasextractedbymethanolafteradjustingthesolutionpHto6～7.TheresultscanshowtherealcontentofthetwoformsofMonacolinKinthesamples.PigmentswerefoundtoeffectthedeterminationofMonacolinK.However,thiseffectcanoftenbeignoredwhenthepigmentcontentislowandMonacolinKcontentishigh.Keywords:Monascus;functionalMonacsusredrice;MonacolinK;HPLC红曲是我国的传统发酵产品,长期用于食品着色和酿酒.近年来,对红曲霉功能性代谢产物的研究十分活跃.红曲产品中具有降血脂作用的功能性成分有多种,1979年,日本远藤章[1]从红曲霉属©1994-2006ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net[Monascusruber(红色红曲霉)]的培养液中获得一种胆固醇合成抑制剂MonacolinK(莫纳可林K,也作Lovastatin,Mevinolin),它能有效抑制胆固醇生物合成中的关键酶HMG2CoA(32羟基232甲基2戊二酰基2辅酶A还原酶)的活性,从而能调节人体内异常血脂的作用.其后,又从M.ruber培养物中获得抑制胆固醇合成的物质莫纳可林X,J,L,M等,总称Monacolins[2～4],但起主要作用的物质是MonacolinK,即洛伐它汀.MonacolinK在常态下是透明的针状结晶,不易溶于水,易溶于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿和苯;分子式:C24H36O5(内酯型),相对分子质量:404.55;结构式见图1.在酸性条件下有酸型和内酯型两种形态.图1酸性环境下莫纳可林K两种形态的动态平衡Fig.1BalanceofthetwoformsofMonacolinKinacidcondition关于MonacolinK的测定,目前采用最多的是HPLC法.VincentP.Gullo等人在80年代经过反应形成的洛伐他汀衍生物,用反相HPLC法对Lovastatin进行定量测定[5].目前基本上已形成了以C18柱作为分离柱,联合紫外检测(237nm或230nm),采用乙腈或甲醇和磷酸水溶液混配比作为流动相的HPLC检测方法[6～8].有的方法[9]在HPLC之前,也采用柱分离色素的预处理方法;在精度要求不高时,也利用MonacolinK在237nm波长处有最大吸收而采用紫外分光光度法测定[10],或薄层扫描法测定[11].目前还有采用SFC(超临界流体色谱)测定Lovastatin的方法[12],该方法具有检测速度快、灵敏度高、节省有机流动相的优点,...
