第30卷第6期2011年6月实验室研究与探索RESEARCHANDEXPLORATIONINLABORATORYVol.30No.6Jun.2011DPPH和FRAP法测定41种中草药抗氧化活性陈玉霞,刘建华,林峰,杜向党(河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002)摘要:为了测定41种抗衰老中草药的抗氧化活性,筛选了抗氧化作用强的中草药。实验采用70%的乙醇作溶剂,超声细胞破碎仪对药物进行提取,抗氧化能力的测定使用分光光度计,应用DPPH和FRAP进行测定。通过测定41种中草药乙醇提取液对DPPH自由基的清除能力和FRAP值,表征其抗氧化能力。结果表明:何首乌、大黄、淫羊藿、山楂、白芍、山茱萸等在10mg/mL的浓度下,对DPPH自由基的清除率超过70%,总抗氧化能力的FRAP值>200,抗氧化能力较强;其他药物也有不同程度的抗氧化活性,但作用较弱。关键词:分光光度法;中草药;FRAP法;DPPH法;抗氧化活性中图分类号:R932;R917文献标志码:A文章编号:1006-7167(2011)06-0011-04DeterminationofAntioxidativeActivityof41KindsofChineseHerbalMedicinesbyUsingDPPHandFRAPMethodsCHENYu-xia,LIUJian-hua,LINFeng,DUXiang-dang(CollegeofAnimalHusbandryandVeterinary,HenanAgriculturalUniversity,Zhengzhou450002,China)Abstract:Theantioxidativeactivitiesof41kindsofChineseherbalmedicinesweredeterminedandselected.TheantioxidativesubstanceswereextractedfromChineseherbalmedicinesby70percentethanolandomniruptor.ThespectrophotometricmethodwasusedtostudytheantioxidantactivitiesofmedicinalherbsbyDPPHandFRAPmethods.TheresultsshowthatthesekindsofmedicinalherbsincludingPolygonummultiflorum,Rheumpamatum,Epimediumgrandiforum,Crataegustifiga,Paeonialactiflora,Cornusofficinalishavestrongantioxidantactivities.Whentheconcentrationis10mg/mL,theextractsfromthesesixherbsreduceatleast70%ofDPPHandtheFRAPvalueofantioxidativecapacityismorethan200,andtheothershaveweakerantioxidativeactivity.Keywords:spectrophotometry;Chineseherbalmedicines;DPPHmethod;FRAPmethod;antioxidativeactivity收稿日期:2010-12-26基金项目:“十一五”国家科技支撑计划资助项目(2006BAK02A03-3);河南省青年骨干教师资助计划作者简介:陈玉霞(1973-),女,河南郑州人,硕士,实验师,主要从事药物分析实验技术与管理工作。Tel.:13937170926;E-mail:cyx7304@163.com0引言人体产生的自由基及其诱导的氧化反应与多种疾病密切相关,并可加速人体衰老,抗氧剂能有效清除自由基,延缓人体衰老和预防疾病。目前,在医疗和食品领域使用较多的是合成抗氧剂,而实验动物研究表明,合成抗氧剂,如BHT、BHA对生物体有潜在的毒副作用,加上人们日益追求环保,因此,近年来寻找天然、安全的生物抗氧化剂逐渐成为研究热点[1-2]。中国中草药资源极其丰富,是天然抗氧化剂的重要来源,中草药的抗氧化性已经引起了充分的重视[3-4]。许多学者认为某些中草药的延缓衰老作用与抗氧化作用密切相关[5-8]。本文挑选传统医学认为具有抗衰老作用的41种中草药,采用DPPH法与FRAP法,研究其提取物清除自由基和总的抗氧化能力,旨在为上述药物的更好开发和应用提供实验依据。1实验部分1.1仪器JY92-Ⅱ超声波细胞破碎仪(宁波新芝科器所);UV-2800紫外分光光度计(尤尼柯上海仪器厂);酸度计(意大利哈钠);微量移液器(Eppendorf);FZ102微实验室研究与探索第30卷型植物试样粉碎机(北京市永光明医疗仪器厂)。1.2试剂二苯代苦味酰基自由基(1,1-pheny-2-picrylhydrazyl,DPPH)Sigma;FRAP工作液(300mmol/L醋酸盐缓冲液,10mmol/LTPTZ,20mmol/LFeCL3)现用现配。TPTZ(2,4,6-tripyridyl-s-trizine)Sigma;41种中草药(见表1,购自河南仟僖堂医药公司),其余试剂均为国产分析纯。表141种中草药的DPPH值和FRAP值中草药DPPH/%FRAP中草药DPPH/%FRAP何首乌94.20±1.25700.00±37.37白花蛇舌草15.11±3.7543.00±3.23大黄92.14±0.73660.70±16.16苍术10.77±2.2940.42±2.42淫羊藿87.48±3.90209.14±5.25黑豆9.31±...